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我是一年級一班的學(xué)生,今年七歲了。我自愿申請加入中國少年先鋒隊,戴上鮮艷的紅領(lǐng)巾,成為一名優(yōu)秀的少先隊員。
我要做個好孩子,聽老師的話,努力學(xué)習(xí),認真完成作業(yè),愛護公物,團結(jié)同學(xué),積極參加學(xué)校的各項活動,以實際行動爭取早日入隊。
申請人:xx
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對于我們自己:團隊就是我們的家園,用團結(jié)加固我們的團隊凝聚力,用好學(xué)來加速我們成長的速度,用創(chuàng)新來使我們的項目發(fā)光發(fā)彩,用汗水和努力澆灌出成功的果實。不讓我們的每一個伙伴掉隊,只要我們努力,我們就會成功,我們就會全剩!
對于每一個你:如果你有技術(shù)卻不知道如何走向市場,如果你有創(chuàng)意卻不知道如何將它開發(fā)實踐,如果你有想進行的經(jīng)濟活動卻找不到合作的團隊,如果你有好的項目卻因生活困苦而一籌莫展,如果你有……我們愿意伸出我們的雙手,與您一起共創(chuàng)美好未來,為這個令您苦惱卻有前景的項目添磚加瓦。
二、團隊規(guī)范
1、對于團隊的重大事宜應(yīng)交由隊員全體大會決定,采取少數(shù)服從多數(shù)原則表決產(chǎn)生結(jié)果。
2、對于團隊平時的會議、集會、項目社會實踐等團隊事宜,每位隊員應(yīng)準時參加,不得遲到早退,如有不可抗因素導(dǎo)致無法按時參加,應(yīng)事先向隊長請假,并說明原因。待確認隊長已收到你的請假信息并作出回復(fù)后,方可離隊。
3、平時日常工作事宜由隊長統(tǒng)籌安排并通知各位隊員,隊長安排事宜應(yīng)充分考慮到各隊員的特質(zhì)與團隊項目需求之間的平衡,以便團隊能按時完成任務(wù)。
4、各隊員應(yīng)清楚了解自己的階段性工作,如有困難,應(yīng)立即向隊長反應(yīng),隊長根據(jù)實際情況,對項目任務(wù)進行快速調(diào)整,以確保項目正常運行。
5、平時各隊員應(yīng)按時完成自己的工作,如果隊員在完成任務(wù)的過程中發(fā)現(xiàn)自己確實無法按時完成任務(wù),可向隊長報告情況,隊長根據(jù)實際情況進行調(diào)節(jié),隊員也可自己尋找其他隊員幫忙。
一、重視引領(lǐng)作用,充分促進大慶精神鐵人精神的提升
一是著力于建設(shè)長效教育機制。結(jié)合基層員工隊伍思想特點,深入開展“學(xué)鐵人,立新功,為企業(yè)發(fā)展做貢獻”教育活動,堅持頻道不換,內(nèi)容常新。通過開展“大慶精神我傳承,我為企業(yè)建功勛”大討論、“石油工人心向黨”心得文章展示和“光榮與責(zé)任”老黨員交流會等活動,把傳唱“我為祖國獻石油”的過程變成對企業(yè)精神認同的過程。通過持續(xù)努力,目前已初步形成以“三個一”為主要內(nèi)容的宣傳教育長效機制。即:以油田公司宣傳部編寫的《大慶精神鐵人精神培訓(xùn)教材》等為主的一套教材,以傳播大慶精神、鐵人精神為主要內(nèi)容的一個基層隊企業(yè)文化宣傳平臺,以入廠入黨教育、“優(yōu)秀班組”“優(yōu)秀班員”評選等為載體的一套考核體系。同時,充分利用成熟的主題教育實踐活動推進體系,把大慶精神、鐵人精神再教育與到主題實踐活動相結(jié)合,引導(dǎo)廣大員工立足大局看問題,著眼發(fā)展看問題,營造出“我為祖國獻石油、我與企業(yè)同成長”的濃厚氛圍和主流價值觀體系。
二是加大豐富文化理念內(nèi)涵。按照“六統(tǒng)一”要求,除了宣貫內(nèi)容,還注重及時發(fā)現(xiàn)、積極培育和大力倡導(dǎo)干部員工中不斷涌現(xiàn)出來的嶄新文化元素,用符合發(fā)展要求的新理念豐富大慶精神、鐵人精神。結(jié)合油田公司“五項實踐”活動,立足基層作業(yè)隊生產(chǎn)經(jīng)營和員工隊伍建設(shè)實際,認真開展基層站隊“4+1”活動。在開展各項工作的過程中,秉承“隊訓(xùn)要展示、鐵人要亮相、故事要巡講、陣地要塑形、方法要成冊”的原則有序開展,實現(xiàn)用“隊訓(xùn)”來凝聚人心,用“鐵人”來示范引領(lǐng),用“故事”來豐富內(nèi)涵,用“陣地”來增強素質(zhì),用“方法”來促進工作水平提升的最終目的。期間,以“人人參與”為原則,拍攝了隊訓(xùn)展示短片,開展了“身邊的感動”故事大賽、特色管理法評選、“講美言、踐美行、傳美德”主題活動等一系列的活動,使“4+1”活動彰顯出強勁的生命力和感染力。在此濃厚的企業(yè)文化建設(shè)氛圍基礎(chǔ)上,“安全班組文化”、“個人魅力展示”、“衣柜文化”等一批具有行業(yè)特色的文化理念在各班組落地生根、蓬勃發(fā)展,大慶精神鐵人精神內(nèi)涵在新時期得到了進一步的豐富和延伸。
二、力推習(xí)慣養(yǎng)成,使大慶精神鐵人精神在員工中“生根”
一是持續(xù)宣貫,植入理念。把功夫重點下在文化培育和行為養(yǎng)成上,努力用《中國石油企業(yè)文化建設(shè)工作條例》統(tǒng)一思想、凝聚力量、規(guī)范行為。不斷加大灌輸力度,認真學(xué)習(xí)《大慶精神鐵人精神再教育學(xué)習(xí)資料》、《形式任務(wù)教育宣講提綱》,助力干部員工全面系統(tǒng)的開展學(xué)習(xí);根據(jù)基層隊實際工作環(huán)境,建立了微展板、活動展臺等宣傳載體,并適應(yīng)數(shù)字時代所需,迎合員工所思所好,加強網(wǎng)絡(luò)陣地建設(shè),搭建了方便快捷的微信、QQ信息平臺。該文原載于中國社會科學(xué)院文獻信息中心主辦的《環(huán)球市場信息導(dǎo)報》雜志http://總第547期2014年第15期-----轉(zhuǎn)載須注名來源在實踐上我們也不斷創(chuàng)新,從提升員工的基本素質(zhì)和個人修養(yǎng)出發(fā),開展了“講美言,用美言,美言伴我行”活動;從促進員工創(chuàng)造美、傳承美的角度出發(fā),組織召開了“與美德同行”討論會;從提升廣大員工的業(yè)務(wù)水平和文化水平出發(fā),開展了“雙十讀書活動”等全員讀書活動。通過這一系列活動,力求實現(xiàn)深入宣貫、激烈討論、活動持續(xù)開展的全方位、無死角宣貫網(wǎng)絡(luò),在耳濡目染和潛移默化中,使大慶精神鐵人精神成為員工的行為指南。
二是注重引導(dǎo),規(guī)范行為。通過選樹有代表性的繼承和發(fā)揚大慶精神、鐵人精神的典型,真實生動地告訴身邊的每一名干部員工:實現(xiàn)“雙千企業(yè)目標(biāo)、建設(shè)百年遼河夢想,必須堅持大慶精神鐵人精神、必須發(fā)揚石油傳統(tǒng)不能丟,尤其像基層作業(yè)隊工作特點,更需要堅持‘我為祖國獻石油’的價值觀,更需要勇于拼搏艱苦奮斗的干勁”。為了將這種認識和體會烙印員工身心當(dāng)中,貫徹到生產(chǎn)經(jīng)營當(dāng)中,我們通過推行企業(yè)文化早報的模式和認真開展“黨員承包設(shè)備”活動,讓大慶精神鐵人精神人格化、具體化、形象化,更好地發(fā)揮其凝聚人、引導(dǎo)人、激勵人的作用,使堅持“三老四嚴”、“四個一樣”行為規(guī)范在全隊上下蔚然成風(fēng)。
三、加強典型作用,保持員工積極向上良好工作狀態(tài)
一是完善典型的樹立制度,發(fā)揮典型感召鼓舞作用。深挖基層人員典型。以“五項實踐”活動為有利契機,優(yōu)選基礎(chǔ)管理好的班組,認真總結(jié)了他們的特色管理法,在全隊進行推廣,讓員工覺得抓“三基”工作看得見、摸得著、易操作,增強了先進典型的說服力、感召力和生命力。充分利用其他行業(yè)系統(tǒng)典型,通過學(xué)典型、比典型,認真開展優(yōu)秀班組員工的評選,涵蓋了全隊各崗位,實現(xiàn)了全人員、全崗位的覆蓋。建立典型儲備檔案,以不同崗位、工齡等不同錄入層面,通過各種評選活動,對各類典型模范進行統(tǒng)一梳理、分類評選,將優(yōu)選的典型存入檔案中,方便全隊員工學(xué)習(xí),使大慶精神鐵人精神學(xué)習(xí)教育工作步入科學(xué)化、系統(tǒng)化軌道。
二是根據(jù)實際需要,發(fā)揮典型引領(lǐng)示范作用。通過選準角度,注重培養(yǎng),挖掘內(nèi)涵,讓群眾真正感到典型人物的可敬、可比、可學(xué),發(fā)揮輻射帶動作用。為了縮短先進典型與普通員工之間的距離感,借助上級的力量,在可以邀請的典型模范數(shù)據(jù)庫中甄選各行業(yè)、各崗位最具代表性的典型人物,組織“向榜樣的學(xué)習(xí)”討論會,甄選了模范典型與班組結(jié)對開展活動。這些員工身邊的、同行業(yè)、甚至同崗位的先進人物使典型的示范引領(lǐng)作用發(fā)揮出了事半功倍的效果,使大慶精神鐵人精神在全隊上下得到了高度的傳承與弘揚,為促進基層作業(yè)隊生產(chǎn)經(jīng)營活動的順利推進提供了強大的精神動力。
中關(guān)于外國法院的離婚判決,在國內(nèi)如何申請承認,應(yīng)視作出判決的國家與我國是否訂立司法協(xié)助協(xié)議而定,對與我國有司法協(xié)助協(xié)議的外國法院作出的離婚判決,按協(xié)議的規(guī)定申請承認。對與我國沒有訂立司法協(xié)助協(xié)議的外國法院作出的離婚判決,中國籍當(dāng)事人可以根據(jù)最高人民法院關(guān)于中國公民申請承認外國法院離婚判決程序的問題的規(guī)定向人民法院申請承認該外國法院的離婚判決。
向人民法院申請承認外國離婚判決須提交書面申請書,外國法院的離婚判決書正本及經(jīng)證明無誤的中文譯本。申請書應(yīng)記明以下事項:1.申請人姓名、性別、年齡、工作單位、住址等基本情況;2.判決作出的國家、判決結(jié)果、時間、生效時間;3.傳喚應(yīng)訴情況;4.申請理由及請求;5.其他情況的說明。由申請人住所地的中級人民法院受理,住所地與經(jīng)常居住地不一致的,由經(jīng)常居住地法院受理,申請人不在國內(nèi)的由申請人原國內(nèi)住所地中級人民法院受理。
人民法院受理申請后七日內(nèi)決定是否立案,決定立案的,由三名審判員組成合議庭進行審理,作出的裁定是終審裁定不得上訴。
一、依申請民事監(jiān)督向依職權(quán)民事監(jiān)督轉(zhuǎn)化的原因
檢察機關(guān)依當(dāng)事人申請民事監(jiān)督案件向依職權(quán)案件轉(zhuǎn)化的基礎(chǔ),一是檢察機關(guān)的民事檢察監(jiān)督權(quán)與當(dāng)事人的私權(quán)處分權(quán)性質(zhì)存在的差異,檢察機關(guān)的民事檢察監(jiān)督權(quán)是一項公權(quán)力,它既是檢察機關(guān)的權(quán)利,又是檢察機關(guān)的義務(wù),檢察機關(guān)不能放棄,而當(dāng)事人的處分權(quán)是私權(quán)力,可以行使也可以不行使,也可以先行使并中途放棄。二是權(quán)利目標(biāo)不同。民事檢察監(jiān)督的目的是維護公平正義,保障國家法制統(tǒng)一,是基于對案件的客觀評價;而當(dāng)事人行使處分權(quán)進行申訴的目的在于追求自身利益的最大化的實現(xiàn),其對案件的評價往往主觀傾向很強,實踐中曾有過這種案例,當(dāng)事人在法院進行訴訟后勝訴,判決生效后案件進入執(zhí)行階段,當(dāng)事人發(fā)現(xiàn)依判決確定的被執(zhí)行人的財產(chǎn)不足以履行債務(wù),當(dāng)事人便認為法院的判決有問題,向檢察機關(guān)申訴。
二、依申請民事監(jiān)督案件向依職權(quán)民事監(jiān)督案件轉(zhuǎn)化的正當(dāng)性
(一)檢察機關(guān)是啟動民事檢察監(jiān)督程序的正當(dāng)主體
第一,檢察機關(guān)作為民事檢察監(jiān)督程序啟動主體的有著法律淵源。首先是在《民事訴訟法》中的淵源,該法第二百零八條、第二百零九條規(guī)定了人民檢察院的民事檢察監(jiān)督權(quán),但是并沒有具體規(guī)定明確可行的監(jiān)督程序。其次是在司法解釋中的淵源,《檢察機關(guān)執(zhí)法工作基本規(guī)范》9·2條規(guī)定:“人民檢察院受理的民事、行政案件,主要有以下來源:(一)當(dāng)事人或者其他利害關(guān)系人申訴的;…(四)人民檢察院自行發(fā)現(xiàn)的。第四項的規(guī)定的人民檢察院自行發(fā)現(xiàn)就是指人民檢察院依職權(quán)啟動民事檢察監(jiān)督程序的情形,故檢察機關(guān)作為啟動民事檢察監(jiān)督的主體是有法可依的。
第二,檢察機關(guān)作為啟動民事檢察監(jiān)督的主體符合民事檢察監(jiān)督的制度價值。民事檢察監(jiān)督的價值并非在于對私權(quán)的保護,而是在于對法院審判權(quán)這一公權(quán)力的監(jiān)督,通過對法院民事訴訟活動的監(jiān)督,防止由于司法權(quán)力的濫用造成司法不公。
第三,檢察機關(guān)依職權(quán)啟動民事檢察監(jiān)督程序是民事檢察監(jiān)督權(quán)的性質(zhì)的要求。民事檢察監(jiān)督權(quán)是民事檢察監(jiān)督工作的依據(jù)和必要條件,民事檢察監(jiān)督權(quán)的性質(zhì)決定了民事檢察監(jiān)督工作的性質(zhì),檢察機關(guān)依職權(quán)啟動民事檢察監(jiān)督程序是監(jiān)督權(quán)權(quán)力性質(zhì)的要求。
第四,檢察機關(guān)行使民事檢察監(jiān)督權(quán)的方式的正當(dāng)性,不會造成對當(dāng)事人私權(quán)利的干涉。雖然民事檢察監(jiān)督權(quán)的運行在客觀上為民事訴訟主體提供了一種私權(quán)救濟渠道,但是從該項權(quán)利的運行方式來看,其運行方式體現(xiàn)了公權(quán)力對公權(quán)力監(jiān)督、制衡這一基本價值目標(biāo)。
(二)檢察機關(guān)啟動民事檢察監(jiān)督程序不以當(dāng)事人申請為前提
第一,當(dāng)事人并非民事檢察監(jiān)督權(quán)的啟動主體。首先,檢察權(quán)是憲法賦予檢察機關(guān)的一項權(quán)利,民事檢察監(jiān)督正是檢察權(quán)在民事訴訟領(lǐng)域中的體現(xiàn),因此民事檢察監(jiān)督的啟動主體只能是檢察機關(guān)。其他任何組織及個人由于不享有檢察權(quán),自然也就不能成為啟動民事檢察監(jiān)督程序的主體。其次,申訴權(quán)只是法律賦予當(dāng)事人對自身私權(quán)利的一種救濟方式,即通過向檢察機關(guān)申請對法院個案啟動民事檢察監(jiān)督程序,其申請不必然啟動民事檢察監(jiān)督程序,其自然不是民事檢察監(jiān)督程序的啟動主體。
第二,民事檢察監(jiān)督程序的啟動并非為保障私權(quán)。民事檢察監(jiān)督程序的目的是從客觀上對整個民事訴訟過程進行法律監(jiān)督,從而保障公平正義,實現(xiàn)整個國家法制的統(tǒng)一。檢察機關(guān)行使民事檢察監(jiān)督權(quán)力主要是通過抗訴與檢察建議兩種手段。依照現(xiàn)行的法律規(guī)定,檢察機關(guān)通過這兩種方式進行法律監(jiān)督的過程均不直接參與到當(dāng)事人之間的對抗之中,檢察機關(guān)對于抗訴的案件在再審開庭審理的時候雖然派檢察員到場,但是根據(jù)《檢察機關(guān)執(zhí)法工作基本規(guī)范》9·53條規(guī)定檢察人員出席抗訴案件再審法庭的任務(wù)是(一)宣讀抗訴書;(二)對人民檢察院依職權(quán)調(diào)查收集的證據(jù)予以出示和說明。這也表明檢察機關(guān)在抗訴案件再審法庭的過程中只是站在客觀、中立的角度進行監(jiān)督,并非對雙方當(dāng)事人中任何一方的支持。這點在實踐中也是有明確體現(xiàn)的,檢察機關(guān)在辦理民事檢察監(jiān)督案件的過程中對新證據(jù)的收集的標(biāo)準上并非以對申訴一方當(dāng)事人有利為原則,而是以使整個案件的事實清楚為原則。
三、依申請民事監(jiān)督案件向依職權(quán)民事監(jiān)督案件轉(zhuǎn)化所存在的問題及處理
(一)當(dāng)事人處分權(quán)與民事檢察監(jiān)督權(quán)“沖突”所引起的問題
1、民事案件立案監(jiān)督上的問題。新修訂的民事訴訟法第14條規(guī)定,人民檢察院對民事訴訟活動進行監(jiān)督。立案環(huán)節(jié)當(dāng)然的包含于民事訴訟活動,檢察機關(guān)對法院立案活動的監(jiān)督既是法律賦予檢察機關(guān)的權(quán)力,又是檢察機關(guān)的義務(wù)。檢察機關(guān)若發(fā)現(xiàn)法院民事訴訟立案環(huán)節(jié)中存在違法問題,應(yīng)當(dāng)依法對法院進行監(jiān)督。若一方當(dāng)事人認為法院的立案環(huán)節(jié)違反法律規(guī)定,對其訴訟請求不予立案,向檢察機關(guān)進行申訴,但是在檢察機關(guān)受理并發(fā)現(xiàn)法院確有違法問題后,提出申請的當(dāng)事人撤回申請,不再,如何處理?對此,檢察機關(guān)是否應(yīng)當(dāng)繼續(xù)監(jiān)督?
2、民事案件調(diào)解監(jiān)督上的問題。檢察機關(guān)對調(diào)解的監(jiān)督是民事訴訟法修改的另一大亮點,但對于檢察機關(guān)依職權(quán)辦理由當(dāng)事人申請轉(zhuǎn)化而來的調(diào)解監(jiān)督案件也提出了一個問題,如果當(dāng)事人在申請檢察機關(guān)對法院的調(diào)解案件進行監(jiān)督后又認可的調(diào)解協(xié)議,檢察機關(guān)對該調(diào)解案件是否應(yīng)繼續(xù)監(jiān)督?
(二)檢察機關(guān)監(jiān)督應(yīng)注重民事檢察監(jiān)督權(quán)與當(dāng)事人處分權(quán)之間的協(xié)調(diào)
1、當(dāng)事人處分權(quán)的含義。當(dāng)事人處分權(quán)是指當(dāng)事人依法享有決定是否以及如何行使權(quán)利并且具有約束力的權(quán)利和自由。處分權(quán)包括民事實體權(quán)利、民事訴訟權(quán)利兩方面。前者指原告時可自行確定其請求司法保護的范圍和方法。民事爭議發(fā)生后,權(quán)利人有權(quán)依法自由選擇自己所受保護的方法。后者是當(dāng)事人行使其它實體權(quán)利的基礎(chǔ)。原告在法律規(guī)定的時間內(nèi)可以變更訴訟請求;原被告可以達成調(diào)解協(xié)議或和解;當(dāng)事人有權(quán)決定是否請求法院強制執(zhí)行生效裁判。
民事訴訟作為國家公權(quán)力解決民事糾紛的一種機制,是為了定紛止?fàn)?。本質(zhì)上說,民事訴訟是私權(quán)訴訟,強調(diào)私權(quán)自治,民法中的私權(quán)自治原則是民事訴訟法中處分權(quán)的理論基礎(chǔ),按照傳統(tǒng)民法觀念,私權(quán)神圣,應(yīng)受到法律的充分保障,任何人不得侵犯,非依司法程序不得限制或剝奪,體現(xiàn)在民事訴訟中,當(dāng)事人有權(quán)依照自己的判斷行使訴訟權(quán)利,當(dāng)事人處分權(quán)應(yīng)處于主導(dǎo)地位。當(dāng)事人處分權(quán)是法律針對當(dāng)事人的民事權(quán)利和訴訟權(quán)利而設(shè)置的,當(dāng)事人雙方平等享有,只是內(nèi)容稍有差異。比如,原告享有提訟、放棄訴訟請求、撤回、選擇受訴法院的權(quán)利,被告享有承認或反駁原告訴訟請求、提起反訴、提出管轄權(quán)異議的權(quán)利,雙方都享有委托訴訟人、搜集提供證據(jù)、法庭辯論、請求調(diào)解、自行和解、提起上訴、申請再審的權(quán)利等。
【摘要】
目的 觀察腦益康對D半乳糖誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元凋亡的影響。方法 制備腦益康藥物血清。應(yīng)用D半乳糖誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元損傷,測定細胞存活率及細胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)活力和丙二醛(MDA)含量,檢測海馬神經(jīng)元Bcl2 mRNA的表達。結(jié)果 腦益康藥物血清可顯著提高細胞存活率和SOD及GSHPx活力(均P<0.01),降低MDA含量(P<0.01),上調(diào)Bcl2 mRNA的表達(P<0.05)。結(jié)論 腦益康可通過提高海馬神經(jīng)元的自由基清除能力,減輕脂質(zhì)過氧化損傷,上調(diào)Bcl2 mRNA的表達來對D半乳糖損傷的海馬神經(jīng)元發(fā)揮保護作用,減少細胞凋亡。
【關(guān)鍵詞】 腦益康;D半乳糖;海馬神經(jīng)元;Bcl2
【Abstract】 Objective To observe the effect of Naoyikang serum on hippocampal neuron apoptosis induced by Dgalactose (Dgal). Methods Naoyikang serum was prepared in rats administered with aqueous extract of Naoyikang (6.84 g·kg-1·d-1) . MTT assay was applied to evaluate the viability of hippocampal neuron, biochemical method was used to assay SOD, GSHPx activity and MDA, RTPCR was used to determine the expression of Bcl2. Results Dgal (100 μmol/L) significantly decreased viability of hippocampus neurons 24 h after treatment. The percentage of cell death and MDA were reduced and SOD and GSHPx activity and the expression of Bcl2 were increased by the treatment with Naoyikang serum. Conclusions Naoyikang could prevent hippocampus neurons from Dgal induced cytotoxicity possibly by the mechanism of increasing SOD and GSHPx activity and Bcl2 expression, while decreasing MDA content.
【Key words】 Naoyikang; Dgalactose; Hippocampus neuron; Bcl2
阿爾茨海默?。ˋD)是老年人中最常見的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,嚴重危害老年人的身心健康,并給其家庭和社會帶來沉重負擔(dān)。目前治療AD的方法僅能緩解癥狀,不能改變疾病病程,尚無有效預(yù)防和治愈措施,因而研究開發(fā)有效的藥物成為熱點。近年來,氧化應(yīng)激和氧自由基在AD發(fā)病中的作用已經(jīng)被許多體外實驗和臨床研究所證實〔1〕。腦益康(naoyikang,NYK)是由制首烏、知母、巴戟天等組成的中藥復(fù)方,具有藥物多靶位作用〔2~4〕。本實驗運用血清藥理學(xué)方法制備腦益康藥物血清,采用D半乳糖(Dgalactose ,Dgal)建立AD細胞模型,觀察腦益康藥物血清對AD細胞模型的保護作用及其機制,為腦益康的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 動物
雄性SD大鼠,體重(250±10)g;24 h內(nèi)SD新生鼠;均由南通大學(xué)實驗動物中心提供。合格證號:SYXK(蘇)20020022。
1.1.2 藥品與試劑
NYK由南通市中醫(yī)院制劑室制成顆粒劑。Dgal(上海恒信化學(xué)試劑有限公司);維生素E(VitE,南京白敬宇制藥廠);DMEM培養(yǎng)基(美國GIBCO公司);胎牛血清(杭州四季青生物制品公司);四甲基偶氮唑鹽(MTT,上海實生細胞生物技術(shù)有限公司);考馬斯亮藍法測蛋白試劑盒、丙二醛(MDA)試劑盒、超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)試劑盒(南京建成生物醫(yī)學(xué)工程研究所)。PCR引物由上海英駿生物技術(shù)服務(wù)有限公司合成。
1.1.3 儀器
754型紫外可見分光光度計(上海光譜儀器有限公司);核酸蛋白定量監(jiān)測儀(德國Biophotometer公司);PTC100型PCR儀(美國MJ.RESEARCH.INC.);小源凝膠圖像分析系統(tǒng)(上海小源科技有限公司)。
1.2 方法
1.2.1 NYK藥物血清的制備
雄性SD大鼠15只,隨機分為正常對照組、VitE處理組和NYK處理組,每組5只。所有動物自由飲水,適度光照。正常對照組:喂養(yǎng)基本飼料觀察3 d后,用生理鹽水10.0 ml/kg灌胃。VitE處理組:將VitE溶于菜油中,配成0.125%的溶液,按10.0 ml/kg灌胃。NYK處理組:將中藥顆粒加ddH2O,配成17.1%的水溶液,按10.0 ml/kg灌胃(相當(dāng)于臨床成人用量)。各組大鼠每天灌胃2次,連續(xù)3 d〔5〕,末次灌藥后1 h頸總動脈取血,4℃過夜,待全血凝固后,2 500 r/min離心20 min,分離血清,經(jīng)56℃,30 min滅活,0.22 μm濾膜過濾除菌,-70℃保存?zhèn)溆谩?/p>
1.2.2 海馬神經(jīng)元的培養(yǎng)
取新生24 h的SD大鼠,無菌條件下取腦,分離雙側(cè)海馬,剔除血管,用冰浴DHank′s液洗2次,剪碎,0.125%胰蛋白酶2 ml,37℃消化30 min,每5 min振蕩1次。用等體積含10%胎牛血清的DMEM終止消化,吹打成細胞懸液,1 000 r/min離心10 min,棄上清,吹打分散細胞,分別經(jīng)60目和200目的篩網(wǎng)過濾。計數(shù)后將細胞懸液稀釋至所需密度接種于用0.1 mg/ml多聚賴氨酸處理的培養(yǎng)板。48 h后加入終濃度為10 μmol/L阿糖胞苷作用24 h更換新培養(yǎng)液,以后每2天半量換液,培養(yǎng)6 d的海馬神經(jīng)元用于實驗。
1.2.3 分組與處理
將細胞分為正常對照組、模型組、VitE處理組、NYK處理組。正常對照組:培養(yǎng)6 d的海馬神經(jīng)元,棄培養(yǎng)液,加入無血清DMEM和10%正常大鼠血清培養(yǎng)24 h。模型組:培養(yǎng)6 d的海馬神經(jīng)元,棄培養(yǎng)液,加入無血清DMEM、10%正常大鼠血清和Dgal(Dgal終濃度為100 mmol/L〔6〕)培養(yǎng)24 h。VitE處理組:培養(yǎng)6 d的海馬神經(jīng)元,加入無血清DMEM和10% VitE藥物血清后1 h,再加入Dgal培養(yǎng)24 h。NYK處理組:培養(yǎng)6 d的海馬神經(jīng)元,棄培養(yǎng)液,加入無血清DMEM和NYK藥物血清后1 h,再加入Dgal,其中藥物血清分別以5.0%、10.0%、20.0%稀釋濃度添加〔7〕,培養(yǎng)24 h。
1.2.4 MTT法檢測NYK藥物血清對Dgal誘導(dǎo)損傷后海馬神經(jīng)元存活率的影響
常規(guī)培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元用含有10%胎牛血清的DMEM稀釋成5×105個/ml,每孔100 μl接種于96孔培養(yǎng)板中,使各孔細胞數(shù)基本相同;培養(yǎng)板的第1列不接種細胞而每孔只加無細胞DMEM,作為空白調(diào)零孔。培養(yǎng)6 d后,棄培養(yǎng)液,設(shè)正常對照組、模型組、VitE處理組、NYK處理組,每組11個復(fù)孔。每孔加入25 μl MTT溶液(終濃度1 mg/ml),孵育4 h,每孔再加入100 μl 20% SDS,繼續(xù)孵育24 h后取出,用酶標(biāo)儀測定各孔在570 nm處的光吸收值并計算出細胞存活率。細胞存活率=實驗組OD/對照組OD×100%。
1.2.5 生化指標(biāo)的檢測
常規(guī)培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元用含有10%胎牛血清的DMEM稀釋成5×105個/ml,每孔1 ml接種于24孔培養(yǎng)板中,使各孔細胞數(shù)基本相同;培養(yǎng)6 d,各組細胞按不同的要求處理,用于檢測生化指標(biāo)。收集細胞上清液檢測MDA含量、SOD和GSHPx活力。細胞培養(yǎng)液直接加樣檢測。具體方法見試劑盒說明書。
1.2.6 檢測海馬神經(jīng)元Bcl2 mRNA的表達
常規(guī)培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元用含有10%胎牛血清的DMEM稀釋成1×106/ml,每孔2 ml接種于6孔培養(yǎng)板中,使各孔細胞數(shù)基本相同。培養(yǎng)6 d后各組按不同的要求處理,用于RTPCR檢測。βaction:引物序列為上游5′gcaccacactttctacaatga3′,下游5′gaaccgctcattgccgatagt3′,508 bp;Bcl2:引物序列為上游5′cgactttgcagagatgtcca3′,下游5′catccacagagcgatgttgt3′,202 bp。按照常規(guī)步驟提取各組細胞的RNA,并逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。按設(shè)定的程序進行PCR擴增反應(yīng)。反應(yīng)條件:Bcl2:94℃ 3 min,94℃ 40 s,48℃ 30 s,72℃ 45 s(循環(huán)35次),72℃ 10 min。βaction為內(nèi)參。瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物,用Scion Image圖像分析軟件對電泳結(jié)果進行分析,以目的基因帶密度與內(nèi)參βaction帶密度的比值表示該基因mRNA相對含量。
1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
所有數(shù)據(jù)均以x±s表示,用SAS7.0統(tǒng)計軟件處理,進行方差分析和兩兩比較,對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。
2 結(jié) 果
2.1 NYK藥物血清對Dgal誘導(dǎo)損傷后海馬神經(jīng)元存活率的影響
MTT法測定顯示,各組海馬神經(jīng)元存活率均比正常對照組(細胞存活率設(shè)為100%)低,模型組細胞存活率(0.367±0.104)顯著降低(P<0.01)。與模型組相比,VitE處理組(0.882±0.749)、5%NYK處理組(0.826±0.129)、10%NYK處理組(0.794±0.257)、20%NYK處理組(0.736±0.166)存活率升高(P<0.01)。
2.2 NYK藥物血清對Dgal誘導(dǎo)損傷后海馬神經(jīng)元MDA含量、SOD、GSHPx活力的影響
模型組MDA含量顯著高于正常對照組(P<0.01)。5%、10%NYK處理組MDA含量顯著低于模型組(P<0.01)。模型組SOD及GSHPx活力顯著低于正常對照組(P<0.01)。VitE處理組和NYK處理組SOD及GSHPx活力顯著高于模型組(P<0.01)。見表1。
2.3 NYK藥物血清對Dgal誘導(dǎo)損傷后海馬神經(jīng)元Bcl2 mRNA表達的影響
模型組(0.76±0.16)海馬神經(jīng)元Bcl2 mRNA的表達水平與正常對照組(1.24±0.39)比較,有降低趨勢,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。VitE處理組、5%NYK處理組、20%NYK處理組海馬神經(jīng)元Bcl2 mRNA表達分別為1.17±0.27、1.33±0.34、1.07±0.10。10%NYK處理組海馬神經(jīng)元Bcl2 mRNA的表達水平(1.48±0.62)高于模型組(P<0.05)。見圖1。表1 各組海馬神經(jīng)元的MDA含量和SOD、GSHPx活力的比較(略)
3 討 論
腦和神經(jīng)是耗氧率較高的器官,因為含有大量的脂質(zhì),容易因自由基引起氧化應(yīng)激而變得脆弱。在對神經(jīng)內(nèi)科疾病進行分類時發(fā)現(xiàn),以腦卒中、AD、肌萎縮性側(cè)索硬化癥及Parkinson病等與氧化應(yīng)激的關(guān)系最為密切〔8〕。AD患者腦組織和全身各系統(tǒng)都存在氧化應(yīng)激,氧化應(yīng)激是AD發(fā)生發(fā)展過程中的關(guān)鍵因素,在AD早期NFT和SP出現(xiàn)之前就發(fā)揮作用〔1〕,最終可造成神經(jīng)元損傷。因此,近年來自由基所致的氧化應(yīng)激反應(yīng)在AD中的作用受到人們的高度重視,而且自由基損傷在散發(fā)性AD的病因?qū)W意義更是AD研究中最活躍的領(lǐng)域之一。許多研究表明老年人和AD患者腦內(nèi)抗氧化物質(zhì)減少,自由基增多。當(dāng)體內(nèi)Dgal過多時,可產(chǎn)生過多的氧自由基,造成氧化應(yīng)激損傷〔9〕。故本研究采用Dgal誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元損傷,制備AD細胞模型,觀察NYK藥物血清通過抗氧化作用保護細胞,減少細胞凋亡的作用機制。
MTT可以間接反映活細胞的數(shù)量。GSHPx是一種重要的催化H2O2分解的酶,SOD則主要清除超氧化物如O2。它們的活力降低,可造成腦內(nèi)大量自由基的堆積,使許多生物大分子發(fā)生過氧化反應(yīng)而交聯(lián)、斷裂,引起一系列異常的生化過程,以致細胞結(jié)構(gòu)和功能破壞等。MDA是不飽和脂肪酸降解的產(chǎn)物,MDA的含量??勺鳛榉从持|(zhì)過氧化程度及間接反映氧自由基對細胞損傷程度。此外Bc12基因家族中Bcl2是抑凋亡基因,同時也具有抗氧化劑作用,可以抑制超氧化物的產(chǎn)生;還可以誘導(dǎo)細胞內(nèi)源性抗氧化物質(zhì)表達,保護其活性,清除產(chǎn)生的自由基,起到抗凋亡作用〔10〕。本實驗提示NYK有一定的神經(jīng)保護作用,適宜的劑量(5%和10%)對Dgal致海馬神經(jīng)元損傷的保護作用較好。其機制可能是通過提高神經(jīng)元的抗氧化能力,降低海馬神經(jīng)元的MDA含量,減輕自由基損傷,上調(diào)海馬神經(jīng)元Bcl2 mRNA的表達,從而發(fā)揮其細胞保護作用,減少細胞凋亡。
參考文獻
1 Ved C,Abha C. Oxidative stress in Alzheimer′s disease〔J〕. Pathophysiology,2006;13(3):195208.
2 耿勁松,周愛玲,茅家慧,等.腦益康對AD大鼠學(xué)習(xí)記憶及海馬NGFTrkA mRNA表達的影響〔J〕.中國老年學(xué)雜志,2009;29(2):1525.
3 朱 燕,周愛玲,茅家慧,等.腦益康對D半乳糖和亞硝酸鈉所致Alzheimer病小鼠模型的保護作用〔J〕.中國應(yīng)用生理學(xué)雜志,2008;24(3):296300.
4 胡亞娥,周愛玲,朱 燕,等.腦益康藥物血清對谷氨酸誘導(dǎo)海馬神經(jīng)元損傷的保護作用〔J〕.中國應(yīng)用生理學(xué)雜志,2007;23(3):3003.
5 王 睿.中藥血清藥理學(xué)研究進展〔J〕.齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2006;27(18):22434.
6 朱 燕,周愛玲,胡亞娥,等.腦益康含藥血清對D半乳糖誘導(dǎo)海馬神經(jīng)細胞損傷的保護作用〔J〕.南通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版),2006;26(1):35.
7 胡亞娥,周愛玲.中藥復(fù)方對原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元生長影響的時效和量效關(guān)系研究〔J〕.南通醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2004;24(4):3634.
8 阿部康三.氧化應(yīng)激與神經(jīng)系統(tǒng)疾病〔J〕.日本醫(yī)學(xué)介紹,2006;27(12):5568.
為在少先隊員中培育和踐行社會主義核心價值觀,開展理想信念教育,教育引導(dǎo)廣大少先隊員做到"記住要求、心有榜樣、從小做起、接受幫助",增強他們對少先隊組織的光榮感、歸屬感,發(fā)揮少先隊鼓號隊在少先隊組織教育、自主教育和實踐活動中的重要作用,紀念少先隊建隊66周年,根據(jù)市少工委安排,我校決定在2015年少先隊建隊66周年紀念日期間,集中開展"紅領(lǐng)巾相約中國夢"系列教育實踐交流展示活動。
二、活動時間
2015年10月13日少先隊建隊紀念日之前
三、活動范圍
未入隊的一年級各班、二、三、四、五、六各中隊
四、活動安排
2、開展"紅領(lǐng)巾相約中國夢"少先隊基本知識教育實踐活動。在10月8日活動課,集中開展針對一年級新入校少年兒童的少先隊基本知識教育實踐活動?;顒拥攸c在二樓的少先隊活動室。主要做法:一是"講一講":請少先隊輔導(dǎo)員和高年級少先隊小干部,向一年級的少年兒童講解黨對少先隊員的希望,講解黨、團、隊的關(guān)系,講解隊章和隊禮精神。二是"看一看":組織少年兒童參觀少先隊隊室、紅領(lǐng)巾廣播站等活動陣地,觀摩少先隊活動課。三是"做一做":鼓勵一年級還沒入隊的少年兒童向隊組織提出入隊申請,入隊前做一件力所能及的好事。
五、工作要求
1、突出活動主題。各中隊輔導(dǎo)員要認真學(xué)習(xí)"六一"重要講話精神,在少先隊員中廣泛培養(yǎng)和踐行社會主義核心價值觀,持續(xù)開展少先隊基本知識教育活動,積極發(fā)揮少先隊鼓號隊在組織教育、自主教育和實踐活動中的重要作用,緊緊圍繞"紅領(lǐng)巾相約中國夢"的主題,精心安排策劃好少先隊活動課,增進少先隊員對少先隊組織的光榮感、歸屬感。
2、做好組織宣傳。各中隊輔導(dǎo)員要精心部署、及時安排,認真組織開展建隊日期間的活動。
3、加強信息報送。少先大隊輔導(dǎo)員、各中隊輔導(dǎo)員于主題隊日活動后,及時向未來網(wǎng)"紅領(lǐng)巾相約中國夢"少先隊基本知識教育實踐活動版塊上傳活動信息,上傳的數(shù)據(jù)比例將納入年終工作考核。
六、采集信息
1.安排專人在少先隊活動課和少先隊基本知識教育實踐活動中進入各班拍攝照片。
2.各中隊輔導(dǎo)員,做好電子版的活動課教案、拍攝照片?;顒咏Y(jié)束后上傳未來網(wǎng)自己的平臺上。
——**村駐村第一隊員 ***
當(dāng)前,新型肺炎防控工作正處在關(guān)鍵時期,全國上下傾盡全力投入到抗擊疫情的戰(zhàn)役中,因為在中國的大地上,武漢很遠,疫情卻很近,無數(shù)的人們,都與我們有關(guān):有的人為我們負重前行,有的人在為我們拼命。作為一名黨員干部及基層干部,作為**村駐村第一隊員,我和我的團隊也沖鋒一線,為鄉(xiāng)親守土盡責(zé)、為村民眾志成城,用責(zé)任和堅守為**村筑起一道牢固的健康防線。
疫情當(dāng)前,我們連續(xù)二個月不離村,給村民發(fā)放傳單3000份、入戶排查,積極協(xié)調(diào)各方為村民做好各種防范工作,利用喇叭、音響開展宣傳,帶動村民主動參與抗擊疫情,展現(xiàn)了駐村隊員的責(zé)任與擔(dān)當(dāng)。我們在**村低山橋關(guān)口進村的路口設(shè)卡輪流值守排查,對過往的車輛一輛一輛去檢查登記,車上人員一個一個去量體溫并嚴格執(zhí)行外出戴口罩制度。對那些外來走親訪友的人員耐心勸說,讓他們主動返回;對當(dāng)?shù)卮迕褚膊环潘?,他們出入村口都要“通行證”。我們的目的是:把疫情堵在外面,內(nèi)防傳染,外防輸入!當(dāng)疫情日漸嚴重,由于聽聞買不到口罩,村民們也開始流言四起,恐慌蔓延,面對這種情況,我們立即行動:一是利用父老鄉(xiāng)親群、拉橫幅、貼標(biāo)語、村大喇叭、流動音響、發(fā)放傳單等媒介入隊宣傳防控疫情知識,教育村民相信政府、相信國家,面對疫情不要恐慌,不信謠、不傳謠;二是把自己購買的一些口罩免費發(fā)放給一些急需口罩的村民或值守人員,還主動協(xié)調(diào)各方的援助,解決了村民的擔(dān)憂,極大的提升了整體隊伍的戰(zhàn)斗力與凝聚力。
作為**村駐村第一隊員,在做好當(dāng)前抗戰(zhàn)疫情工作,確保村民健康的同時,也時刻不忘鞏固提升脫貧攻堅的成果,努力克服疫情對脫貧攻堅的影響。我們發(fā)放2020年扶貧手冊,與幫扶干部一起通過入戶走訪和電話聯(lián)系,再一核對家庭基本信息,及時了解貧困戶的家庭生活,根據(jù)實際情況,實施分類施策,采取更有針對性的措施,制定行之有效的新的幫扶計劃;鼓勵年輕的勞力外出務(wù)工增加收入,做好貧困戶外出務(wù)工人員統(tǒng)計工作,協(xié)助其申請交通、穩(wěn)崗補貼工作;動員在家勞動力發(fā)展種植業(yè)、養(yǎng)殖業(yè),并做好2020年以獎代補的第一批申請、核驗工作,通過這些以求達到內(nèi)增外收的成效,做到持續(xù)鞏固提升脫貧攻堅成果。
根據(jù)法律規(guī)定,喪偶兒媳對公婆、喪偶女婿對岳父、岳母盡了主要贍養(yǎng)義務(wù)的,作為第一順序繼承人??梢妼拧⒃栏改副M主要贍養(yǎng)義務(wù)的,喪偶兒媳、喪偶女婿才可取得繼承權(quán)。那么,如何認定喪偶兒媳、喪偶女婿“盡了主要贍養(yǎng)義務(wù)”呢?根據(jù)相關(guān)司法解釋,對被繼承人生活提供了主要經(jīng)濟來源,或在勞務(wù)等方面給予了主要扶助的,應(yīng)當(dāng)認定其盡了主要贍養(yǎng)義務(wù)。其具體表現(xiàn)在以下三個方面:
(1)在經(jīng)濟上為老人生活提供了幫助,老人主要依靠其提供的經(jīng)濟生活。
(2)為老人日常生活提供幫助,如為老人做飯,打掃衛(wèi)生,生病時進行護理等。
(3)對老人的幫助具有長期性。如屬偶爾的看望有限的勞務(wù)幫助等,不能視為盡了主要贍養(yǎng)義務(wù),不能由此取得第一順序繼承人資格。