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活動名稱:藏藏畫
活動領(lǐng)域:藝術(shù)
適合年齡段:5—6歲
活動目標:
1、巧妙構(gòu)思并設(shè)計制作有趣的畫,感受設(shè)計與生活的關(guān)系。
2、通過設(shè)計制作活動,培養(yǎng)幼兒的創(chuàng)新精神和實踐操作能力。
3、體驗采用多種創(chuàng)作方式創(chuàng)作美術(shù)作品的樂趣。
活動準備:水彩筆、素描紙、刻刀、雙面膠、剪刀
活動過程:
一、開始部分
小朋友們,今天老師請大家認識一位新朋友,他叫七七,不過它可不是我們?nèi)祟?,而是沒有翅膀的七星瓢蟲,這不,他來了……
(翻開隱藏式范畫七七,因未打開隱藏頁,幼兒并未發(fā)現(xiàn))大家看到了嗎?(翻開隱藏頁)原來他的翅膀在這里,想知道七七的翅膀是怎么長出來的嗎?請小朋友們和老師一起進入到奇幻的世界(觀看圖片邊講述七七的故事)
二、基本部分
1、提問:小朋友們覺得故事怎么樣,有什么感想?你喜歡這個故事嗎?知道七七的翅膀是怎樣做成的嗎?
2、將范畫傳到每組讓幼兒分組去觸摸、觀察、分析、討論隱藏式繪畫的做法。
3、幼兒分組討論,講述本組探討后的成果。
小結(jié):同學們說的都非常好,在這里老師再向大家介紹兩種隱藏式書頁的設(shè)計方法。
1、挖洞法:先在整幅畫頁上畫上七星瓢蟲的外殼,后用刀子沿外殼的邊緣及外形
割開,兩端不割斷。這時,七星瓢蟲就能掀開漏出下面的洞來。再在洞的下面附上一張紙,畫上七星瓢蟲的翅膀,當掀開外殼時,就能漏出里面的圖像。
2、加紙遮蓋法:將蝴蝶直接畫在畫紙上,再用其它的紙做一片花瓣,并在它的根部預(yù)留出多余的紙邊,折回后粘在畫頁上。這樣,掀開花瓣,下面的蝴蝶就露出來了。
3、提問:想一想,你認為哪一個故事最適合做成這樣的藏藏畫?是愿意獨立完成還是小組合作的形式?
4、制作的畫不僅要有趣,還要整潔美觀。
5、畫的形狀大小自定,可以是圓的、方的、三角形的、樹葉形的、動物形狀的甚至是不規(guī)則形的,都可以。
6、故事內(nèi)容可以寫在畫的任意一位置,也可以寫在畫的背面
“玩”是每個人的天性,不僅學生愛玩,教師也愛玩,教師如何根據(jù)學生的生理和心理特點,將“玩”的因素滲入美術(shù)教學之中,將死板的美術(shù)活動變成“玩的游戲”,使學生在“玩”中審美,在“玩”中體驗美,在“玩”中創(chuàng)造美,這是一個新的教學嘗試?!巴妗笔襟w驗教學法就是使學生在課堂中感受到“玩”的快樂,教師先創(chuàng)設(shè)一個充滿游戲趣味的活動情景,在游戲中充分“玩”動學生及小組成員主動求知的積極性,積極性起來了,學生也就主動參與進來了,課堂也就“玩”活了,學習興趣也就來了,憑興趣,在“玩”中認識美,在“玩”中體驗美,在“玩”中享受創(chuàng)造美的過程。這樣不僅克服了在課堂中師生對立的“矛盾”,增進師生友誼,提高課堂學習氣氛,培養(yǎng)了興趣,樹立學生學習美術(shù)的自信心,想象力和創(chuàng)造力都得到了很好的發(fā)展,收到事半功倍的效果。
二、什么是個性化教學
針對不同學生的個性特點因材施教,學生都按照自己喜歡的方式去學習,在最短的時間內(nèi)學到最需要的知識,讓學生體會學習的樂趣,讓學生樂于學習。
1.因材施教――讓學習成為快樂
2.激發(fā)學習興趣
引導(dǎo)學生樹立正確的學習觀念,逐步培養(yǎng)學生的學習興趣,教師結(jié)合教育心理咨詢師的心理疏導(dǎo)循序漸進地培養(yǎng)學生的學習習慣,改變填鴨式教學模式,倡導(dǎo)學生主動參與、樂于探究、勤于動手的學習方法,提高學生處理信息的能力獲取新知識的能力,分析和解決問題的能力以及交流與協(xié)作的能力,培養(yǎng)學習習慣,改進學習方法、提高學習能力。
3.教學對象
對所選學生具體分析其學習情況及學生對學習方案的認可度,通過對學習方法的講解,讓學生清楚地知道自己哪些方面存在劣勢、哪些方面有優(yōu)勢,為學生設(shè)計學習及人生目標。
4.分析教材的優(yōu)勢及教材所涉及的內(nèi)容
對內(nèi)容進行分層:哪些內(nèi)容是學生必須掌握的?哪些內(nèi)容是學生容易掌握的?哪些內(nèi)容較深與學生目前的知識水平存在差距?學習的內(nèi)容對學生有哪些實際的幫助?
5.根據(jù)該學生的實際情況及教材的要求具體分析,設(shè)定教學目標、重點要突出技能目標(目標要實際、具體)
6.教學重點
通過教材來確定學生在學習時的重點、難點。
7.為實現(xiàn)教學目標,教師運用簡潔的教學手段,讓學生熟練掌握學習方法,達到預(yù)期教學效果
三、教學策略
要充分確立學習方案順利進行的教學思路,在課堂教學中采取具體可行做法,對教學過程要有一定的預(yù)測并靈活調(diào)控。
四、教學過程
1.與教學策略相符,充分體現(xiàn)師生互動及教師的主導(dǎo)作用
2.提高學生的自信心
要認真總結(jié)新課程改革實施過程中形成的經(jīng)驗,深入研究課程實施過程中出現(xiàn)的新問題、新情況,尋找解決問題的對策。要進一步加強對青年教師的培養(yǎng),搞好基地建設(shè),抓好課題研究。本學期美術(shù)學科教研工作的總體要求是:認真學習和貫徹執(zhí)行《全國基礎(chǔ)教育課程改革綱要(試行)》和全國教學工作會議的有關(guān)精神,充分認識基礎(chǔ)教育課程改革的重要性和艱巨性,增強實施課程改革的使命感和責任感,把課程改革作為教學研究的中心工作,以新課程理念指導(dǎo)課堂教學實踐。
二、主要工作
(一)更新教學理念,指導(dǎo)教學實踐。
1、進一步認真學習《基礎(chǔ)教育課程改革綱要》,更新教學理念,明確課改方向。在改革的實踐中進行理論探索,在實踐積累中進行理論創(chuàng)新,在教改實踐中反思。通過學習和培訓、實踐和反思、改革和創(chuàng)新,全方位地轉(zhuǎn)變教育教學觀念和提高教育教學認識。開放教育觀念、開放教學過程、開放教學空間、使自己成為學生的促進者、教育研究者、課程的建設(shè)者。
2、認真學習和研究基礎(chǔ)教育階段課程標準,搞好課改年級課教材的集體備課,并結(jié)合課堂教學組織觀摩研究課。
3、學習有關(guān)教學策略和教學評價的理論和經(jīng)驗,推進校本課程的研究和開發(fā)。
4、應(yīng)用現(xiàn)代教學理論開發(fā)多媒體教學輔助課件。認真組織學習教育理論刊物、提高搜集信息、處理信息和交流信息的能力,充分利用一切學習資源不斷提高理論素養(yǎng)和知識水平。
(二)改進教研方式,做好教學工作。
1、組織學科新教材的培訓,組織教材分析和教學研究,領(lǐng)會新教材的結(jié)構(gòu)體系和單元教學要求。
2、組織教師學習《市美術(shù)學科教學建議》。
3、注重課程與學生生活經(jīng)驗緊密關(guān)聯(lián),使學生在積極的情感體驗中提高想象力和創(chuàng)造力。
三、日程安排
月份
1、召開全體美術(shù)學科教師會議,布置新學期教研工作。
2、一年級蘇少版課標本教材以及四年級教材的培訓工作。
3、美術(shù)學科協(xié)進組活動
月份
1、小學美術(shù)新課程教學研究課、教材教法研討座談。
2、學科常規(guī)調(diào)研。
3、美術(shù)一年級集體備課。
4、小學美術(shù)學科協(xié)進組活動
月份
1、新教材課堂教學研討活動。
2、課題研究工作。
3、小學美術(shù)學科協(xié)進組活動
月份
1、組織參加市中小學美術(shù)教師多媒體課件評比活動。
2、小學美術(shù)學科協(xié)進組活動
3、課題研究工作。
月份
1、課程改革經(jīng)驗交流座談會。
2、參加市區(qū)美術(shù)學科專業(yè)委員會理事會議,商討下學期工作。
教學目標
了解如何策劃校園活動。
了解怎樣結(jié)合校園活動進行調(diào)查研究。
通過調(diào)查了解活動所涉及的部門與學科。
跨學科全面的思考與設(shè)計創(chuàng)作出好的策劃
重點如何應(yīng)用美術(shù)的形式把校園生活中設(shè)計的方方面面表現(xiàn)出來。
教學難點
難點找準美術(shù)表現(xiàn)形式與活動策劃的結(jié)合點培養(yǎng)綜合解決問題和整體藝術(shù)策劃的能力。
教學準備
教學準備繩子、水彩、水粉顏色、水彩筆、油畫棒等
教學方法引導(dǎo)、探究合作等
板書設(shè)計
教學過程
一、導(dǎo)入
每一年,我們學校都會組織很多活動,如藝術(shù)節(jié)、繪畫展、科技周等等。它們是一次歡樂的盛會,展示自己的舞臺。如果讓我們班來策劃一次活動,我們有這個信心和能力嗎?板書課題:策劃一次校園活動。
二、新授
在課前我們已經(jīng)以藝術(shù)節(jié)為例,請同學們調(diào)查了關(guān)于藝術(shù)節(jié)的策劃知識,你是通過哪種途徑了解的?生答:專業(yè)書、網(wǎng)上的信息、報紙、雜志、訪談?,F(xiàn)在我們以組為單位共同獻計獻策,以出示題板的方式回答問題,比比誰的方案最優(yōu)秀:
(一)藝術(shù)節(jié)策劃方案將涉及哪些的環(huán)節(jié)?請各小組討論后出示題板,看哪一組同學想
到的詳細:(活動時間、地點、目的、各種宣傳和準備、內(nèi)容安排、活動進程、部門分工、費用預(yù)算、負責組織人員等等)
(二)藝術(shù)節(jié)的內(nèi)容有哪些?開幕式、集體表演、歌舞晚會、朗誦會、猜謎大賽、繪畫比賽、演講天地、游戲比賽、圖書大餐、頒獎晚會……
(三)這么多的活動,應(yīng)該有哪方面的準備?同學們出示:場地的租用、人員的安排、
舞臺的設(shè)計、服裝、道具、器材、宣傳品、美術(shù)材料、獎品等等。
(四)要與哪些部門進行溝通?學校后勤部、器材室、團委、歌舞團、演出公司、美術(shù)公司、贊助單位等。策劃活動的確是一個即復(fù)雜又綜合的過程。
(五)哪些內(nèi)容可以借助美術(shù)這種視覺形式來傳達?學生討論:策劃圖、策劃方案、舞臺布置、宣傳品:如海報、吉祥物、會標、紀念冊、請柬、節(jié)目單、面具、簽到冊、標語等等。老師總結(jié):看來,美術(shù)的作用可真不少,形式也是多種多樣。好的藝術(shù)設(shè)計將使主題更加一目了然,獲得更隆重、成功的效果。
(六)以上我們把校園活動涉及的各方面進行了全方位的討論研究,我們?nèi)绾斡妹佬g(shù)的形式表達策劃的內(nèi)容?
用大屏幕顯示策劃圖的繪制方法、流程圖、路線圖、鳥瞰圖、卡通圖、圖表加說明的幾種方法,并加以解釋說明各自的特點。
如流程圖主要顯示機構(gòu)設(shè)置或表達活動流程;路線圖主要顯示各地點的順序;鳥瞰圖是俯視的直觀效果;圖表加說明更使策劃圖文并茂,清楚明了。
值得注意的如何使各圖統(tǒng)一和諧:可利用幾個明度相近的色塊作背景或用線條、文字或圖標分割或組織成組。做到有主有次,多而不亂。
三、作業(yè)
以組為單位,用所學的美術(shù)知識為學校設(shè)計一個最佳方案,可用手繪或電腦等方法。評選標準:緊扣主題;設(shè)計整體、新穎、多樣;色彩和諧;圖文并茂。
四、總結(jié)
開灤集團具有131年的煤炭開采歷史,目前在冊職工8.2萬人,其中,從事煤炭生產(chǎn)的近4.8人,井下作業(yè)人員3.5萬人。,煤炭產(chǎn)量3285萬噸。集團現(xiàn)有生產(chǎn)礦井22對,主要分布在河北的唐山、張家口以及內(nèi)蒙古、山西等地區(qū)。其礦井集中的唐山礦區(qū)水文地質(zhì)條件極為復(fù)雜,水、火、瓦斯、煤塵、地壓等五大災(zāi)害俱全;唐山、林西、趙各莊3個煤礦開采時間已超百年;有5對礦井開采深度超過千米,最深達1157米;大多數(shù)礦井已形成多水平生產(chǎn)、多區(qū)段提升、多級排水系統(tǒng),單翼運輸距離最長達9公里。歷史上也曾多次發(fā)生重特大事故,安全生產(chǎn)工作壓力很大。
開灤集團始終把煤礦安全質(zhì)量標準化作為安全生產(chǎn)最重要的基礎(chǔ)工作和實現(xiàn)安全生產(chǎn)持續(xù)穩(wěn)定發(fā)展的重要保障,堅持常抓不懈。近年來,他們按照貫徹落實科學發(fā)展觀的要求,以創(chuàng)建本質(zhì)安全型企業(yè)為目標,積極推進安全管理創(chuàng)新,充實安全質(zhì)量標準化驗收考核內(nèi)容,建立起安全質(zhì)量標準化與安全文化建設(shè)、規(guī)范操作、改善環(huán)境相結(jié)合的“四位一體”動態(tài)考核驗收常態(tài)機制,提升了安全質(zhì)量標準化總體水平。井上下生產(chǎn)作業(yè)環(huán)境顯著改善,職工隊伍整體素質(zhì)明顯提高,安全生產(chǎn)可控程度進一步增強,為集團公司安全生產(chǎn)狀況的持續(xù)穩(wěn)定奠定了堅實基礎(chǔ)。
二、主要做法及經(jīng)驗
(一)多措并舉,提高職工綜合素質(zhì),為開展安全質(zhì)量標準化打好基礎(chǔ)。
提高人的安全意識和操作技能,規(guī)范人的行為,是實現(xiàn)不斷提高安全質(zhì)量標準化的重要基礎(chǔ)。開灤集團實施“培育煤礦安全文化,塑造本質(zhì)安全型人”工程,重點圍繞提高職工素質(zhì),開展了以下四個方面的工作:
1.實施素質(zhì)提升培訓工程。連續(xù)開展兩個“三年素質(zhì)培訓工程”,通過采取系統(tǒng)培訓、模擬演練、現(xiàn)場糾偏、心理調(diào)適等一系列手段和方法,對新工人、一般從業(yè)人員、特種作業(yè)人員、班組長等不同群體,全面開展理念灌輸、習慣養(yǎng)成訓練、系統(tǒng)追問、危險預(yù)知、危害辨識、操作技能等培訓教育,培育職工樹立良好的行為習慣和職業(yè)素養(yǎng)。培訓結(jié)束后,逐個考核過關(guān);不能過關(guān)者,不得上崗并重新進行培訓教育,職工隊伍綜合素質(zhì)得到了明顯提高。
2.加強班組長隊伍建設(shè)。實施班組長持證上崗制度,制定專門培訓大綱和培訓教材,集中對在崗的班組長開展安全教育培訓,培訓不過關(guān)的撤職換崗。建立后備班隊長選拔培訓機制,從各班隊選拔部分骨干,參加班組長培訓。對班隊長進行定期考核講評,實行末位淘汰,空出的職位,從培訓合格的骨干中選拔任用。
3.推行準軍事化職業(yè)行為訓練。為進一步規(guī)范員工安全操作行為,提高安全質(zhì)量標準化工作的執(zhí)行力,全面開展了準軍事化職業(yè)行為訓練,對職工進行準軍事化班前會、隊列行走、手指口述、安全確認、現(xiàn)場交接班、職業(yè)技能訓練等多項訓練,以嚴明紀律培養(yǎng)職工的自覺管控能力,使職工自我管理意識得到了顯著提升,對落實安全質(zhì)量標準化管理制度以及規(guī)范化作業(yè)標準,起到了一定的保障作用。
4.推行崗位安全確認,手指口述。圍繞提高人的安全質(zhì)量意識和危害辨識控制能力,推行了全員、全方位、全過程、工序化的“三全一化”崗位安全確認。并以“安全預(yù)想、危險預(yù)知”為主要內(nèi)容,全面推行了“手指口述”式安全確認法,進一步強化了現(xiàn)場安全管理,促進了規(guī)范操作的落實。
(二)全面推行“三按”管理,促進安全質(zhì)量標準化動態(tài)達標。
在各生產(chǎn)礦井積極嘗試推行了按規(guī)范設(shè)計、按設(shè)計施工、按標準驗收的“三按”管理機制。按照細化、量化、標準化要求,參照國家和行業(yè)安全標準、技術(shù)規(guī)范,針對企業(yè)實際,修訂了回采、掘進、開拓、機電、運輸、通風等各個系統(tǒng)設(shè)計規(guī)范標準,完善了規(guī)程措施編制、會審、貫徹流程,把按設(shè)計施工列為精細化管理和走動式管理的主要內(nèi)容,實施了施工過程中達不到設(shè)計標準限期整改,以及由下一道工序追償?shù)扔残源胧瑢崿F(xiàn)了安全質(zhì)量標準化動態(tài)達標。
1.按規(guī)范設(shè)計。要求一切井工工程都要有設(shè)計,在規(guī)范設(shè)計流程的基礎(chǔ)上,細化設(shè)計內(nèi)容。對每項工程的每個環(huán)節(jié)、施工現(xiàn)場的每個細節(jié),都以設(shè)計說明書的形式固定下來,逐項提出具體操作要求,明確具體標準。如設(shè)備或材料怎么擺放、管線如何吊掛、采面單體液壓支柱放液閥必須朝向相同等。在規(guī)范設(shè)計內(nèi)容過程中,堅持“從群眾中來,到群眾中去”,針對現(xiàn)場施工內(nèi)容和操作細節(jié),在基層班組廣泛征集設(shè)計內(nèi)容,組織設(shè)計成果觀摩、比較、論證,好中選優(yōu)。
2.按設(shè)計施工。所有生產(chǎn)工作崗位操作全過程都要按設(shè)計標準進行,已開工的工程必須現(xiàn)場懸掛設(shè)計圖表,對施工過程“時時有規(guī)定,處處有標準”。集團公司專門編制了煤礦操作崗位標準化作業(yè)標準,對每一個生產(chǎn)工作崗位、每一道操作工序都作出了具體規(guī)定,并在生產(chǎn)過程中強力推行。每個工作面開工前先檢查按設(shè)計施工的問題,與設(shè)計要求不符不許開工。為促進作業(yè)現(xiàn)場按設(shè)計施工的推行與落實,管理人員在生產(chǎn)過程中堅持走動管理,凡是不按設(shè)計施工的一律掛黃牌、停產(chǎn)整頓,直到驗收合格后才準許恢復(fù)生產(chǎn)。
3.按標準驗收。突出對生產(chǎn)全過程的動態(tài)檢查、班末驗收和竣工后的對標考核,堅持施工過程中管理人員的動態(tài)檢查與班末驗收相結(jié)合,對當班施工質(zhì)量、設(shè)計標準落實情況逐項進行考核打分,實行日清日結(jié)考核。堅持將班末驗收打分結(jié)果與工程竣工后的系統(tǒng)驗收相結(jié)合,作為安全質(zhì)量結(jié)構(gòu)工資的考核依據(jù),做到設(shè)計、施工、檢查、驗收環(huán)環(huán)相扣,全程閉合。
(三)加強安全環(huán)境建設(shè),提高安全質(zhì)量標準化水平。
堅持以人為本,加強地面和井下安全環(huán)境建設(shè),創(chuàng)造良好的環(huán)境,為職工安全與健康提供有力保障,提高了安全質(zhì)量標準化水平。
1.強力導(dǎo)入安全視覺識別系統(tǒng)。采取安全行為準則“符號化、視覺化、標準化”的傳播手段,在企業(yè)所有辦公區(qū)域、生產(chǎn)作業(yè)場所,特別是井下事故易發(fā)地段、交通要道等處,全面導(dǎo)入了svi煤礦安全視覺識別系統(tǒng),推行了反光安全標識和安全設(shè)備設(shè)施編碼管理。在工業(yè)廣場、更衣室、井口設(shè)置了大屏幕,班前會議室配備了多媒體電化教學設(shè)施。安全視覺系統(tǒng)的導(dǎo)入,及時傳播了企業(yè)安全理念和安全信息。
2.強化安全環(huán)境硬件設(shè)施建設(shè)。本著高標準、高層次、高水平的原則,深入推進安全質(zhì)量標準化建設(shè)。各生產(chǎn)礦井全面實施井上井下“亮化、凈化、美化、規(guī)范化”環(huán)境改造工程。從井口到井底車場,從運輸大巷到采區(qū)石門料場,從工作面上下兩巷到采煤工作面,分階段逐步實現(xiàn)全部照明。實踐證明,職工在寬敞明亮的環(huán)境中工作,無論心態(tài)、注意力還是操作的準確度都有較大改觀。
3.營造安全健康文化。從努力改善職工工作 生活環(huán)境入手,著力營造安全健康文化。集團公司上下,全部建立了職工安全健康保障體系,定期開展職工健康檢查,建立了職工安全健康管理檔案,在地面和井下分別建立了保健站、急救站,為每個生產(chǎn)班組配發(fā)了現(xiàn)場急救箱。積極實施為井下生產(chǎn)作業(yè)地點配備蒸箱、飲水機和工作服集中管理的“兩熱一管”工程。對職工食堂、宿舍、更衣室全面實施人性化改造,逐步實現(xiàn)服務(wù)人性化、就餐住宿賓館化、更衣洗浴舒適化、井下服務(wù)地面化,以減輕職工作業(yè)后的疲勞,進一步增強職工凝聚力。
4.著力打造本質(zhì)安全型礦井裝備系統(tǒng)。以實現(xiàn)“機電設(shè)備零隱患、礦井裝備零故障”為目標,實施礦井提升系統(tǒng)數(shù)字化改造和主扇風機安全節(jié)能改造,基本實現(xiàn)了自動化、信息化、數(shù)字化;積極引進大功率、高強度的綜采設(shè)備和免維護減速器,推行掘進工作面軌道化運輸;實施礦井安全監(jiān)測系統(tǒng)升級改造,安裝頂板在線監(jiān)測系統(tǒng),自主研發(fā)了自動閉鎖風門。先后進行了運輸、供電、通風、排水本質(zhì)安全型系統(tǒng)和部位的改造和創(chuàng)建活動,既增強了礦井抗災(zāi)防災(zāi)能力,又提高了安全質(zhì)量標準化的科學管理水平。
(四)創(chuàng)新考核運作機制,確保安全質(zhì)量標準化規(guī)范有序運行。
在堅持安全質(zhì)量標準化區(qū)科旬檢、礦處月驗、集團季檢制度的基礎(chǔ)上,開灤集團深入探索、不斷完善安全質(zhì)量標準化的考核運作機制,使安全質(zhì)量標準化工作逐步納入規(guī)范化、制度化、科學化軌道,保證了安全質(zhì)量標準化工作的規(guī)范運行。
1.改革薪酬分配機制。發(fā)揮政策導(dǎo)向作用,引導(dǎo)職工牢固樹立“安全就是效益”的觀念,推行了獨立于效益工資之外的安全質(zhì)量結(jié)構(gòu)工資制。各生產(chǎn)礦井安全質(zhì)量標準化在工資分配中的比重已全部達到30%以上。改變傳統(tǒng)的“以量計資、超產(chǎn)超尺累加計獎”的考核方式,試行了“定單化生產(chǎn)、市場化運作”的管理模式,促進了基層單位由生產(chǎn)管理型向安全質(zhì)量管理型的轉(zhuǎn)變。
關(guān)鍵詞:電化教學;煤礦安全;教育培訓
中圖分類號:G431 文獻標識碼:B文章編號:1009-9166(2011)011(C)-0191-01
一、在煤礦安全教育培訓工作中運用電化手段教學的必要性
1、煤礦生產(chǎn)過程的復(fù)雜性、員工隊伍的特殊性和安全教育培訓形式的落后性所決定的
眾所周知,煤礦作業(yè)環(huán)節(jié)復(fù)雜,條件惡劣,工作艱苦,危險因素較多,而職工隊伍的構(gòu)成則繁雜多樣,既有全民合同工、集體合同工、又有農(nóng)民勞務(wù)工。特別是采掘一線職工,農(nóng)民工占主要部分,總體來說一線職工的文化素質(zhì)較低,安全意識淡薄,有相當一部分職工不知道(或不重視)如何在保證安全的前提下去生產(chǎn),從而導(dǎo)致了“三違”現(xiàn)象屢屢發(fā)生。這些不利因素的存在,大大增加了我們安全生產(chǎn)中的不確定性。而當前,許多煤礦的安全教育培訓仍沿用念文件、提要求的落后方式,職工或是不愿聽,或是聽不懂,或是記不住,教育效果非常有限。很顯然,淘汰落后的教育培訓方式,積極探索新穎、實用的方式方法,提高安全教育培訓質(zhì)量,已成為煤礦當前一項重要而又緊迫的任務(wù)。
2、電化教育手段本身所具有的鮮明特點所決定的
第一,電化手段作為一種現(xiàn)代化的媒體形式,具有聲、像、色、動的特點,充分利用這些特點可制成有文字、有圖表、有色彩、有動畫的教育課件。第二,利用多媒體可以“再現(xiàn)情景”的特點,拍攝各工種規(guī)范的操作動作和工作程序,具有真實性、直觀性和生動性的特點,用其開展專題教育,可使職工易記、易懂、易接受,入耳、入腦、入心,記得牢,不易忘。第三,這種現(xiàn)代化的媒體形式,為我礦各基層區(qū)隊自行動手制作教育培訓課件構(gòu)建了理想的平臺。第四,隨著聲像技術(shù)的發(fā)展,國家出版部門已發(fā)行了許多內(nèi)容豐富的安全教育光盤,運用多媒體形式播放,可以增加教育內(nèi)容,使職工更多、更快、更好的掌握安全知識,接受更深層次的安全教育。第五,利用這種現(xiàn)代媒體技術(shù),還可以把各區(qū)隊的安全管理制度、安全考核結(jié)果等內(nèi)容,通過區(qū)隊的投影儀,通過井口電子大屏幕、各區(qū)隊的學習室等各個視頻窗口滾動播放,使職工隨時都可以觀看,有了更多的接受安全教育的機會。第六,運用多媒體除可進行多種內(nèi)容的安全教育外,還可以進行安全規(guī)程的貫徹,安全技能的培訓,不斷拓寬教育培訓渠道。特別是對職工進行安全技術(shù)培訓工作,一般會受到時間、空間、設(shè)備、設(shè)施的限制,很難在室內(nèi)進行?,F(xiàn)在利用先進的電化手段,可把包括線路圖在內(nèi)的各種實物影像輸入電腦,通過投影儀播放,不但方便了教學,也提高了培訓工作的效率和效果。
二、在安全教育培訓中如何有效地運用電化手段
以我礦為例,主要采取以下措施。一方面,我礦共投資20余萬元,為教培中心及井下12個生產(chǎn)、輔助區(qū)隊全部配置了筆記本電腦、教學投影儀等多媒體設(shè)備,專門鋪設(shè)了網(wǎng)線并開通了IP地址,使遠教網(wǎng)和電子教室的教學資源得到了共享。另一方面,組織人員進行了大量的前期準備工作,撰寫腳本、制作動畫教材,建立了各種數(shù)據(jù)庫,包括案例教育數(shù)據(jù)庫、規(guī)程教育數(shù)據(jù)庫、各工種(工序)必知必會規(guī)范操作數(shù)據(jù)庫等等。二是完善培訓檢查考核辦法,建立了相關(guān)制度。三是強化了相關(guān)管理人員的業(yè)務(wù)培訓工作,使其能夠熟練的掌握和運用計算機、投影儀的相關(guān)知識。同時,還定期組織各基層區(qū)隊技術(shù)員開展實踐教學,采取“一線課堂”、“班前10分鐘精品課件”、“優(yōu)秀教案”評比、技術(shù)比武等方法,充分調(diào)動基層工程管理人員、技術(shù)人員、技能工人在“教”和廣大職工在“學”兩個方面的積極性、主動性、創(chuàng)新性,不僅使優(yōu)秀教師、技術(shù)工人腦袋口袋同富,而且也提高了他們不斷提高課件制作的水平,從而為針對性的搞好安全教育培訓準備了充足的電化教材。
三、電化教學在我礦安全教育培訓中的應(yīng)用
課時:2課時
一、教學目標:
1、學習制作紙漿的步驟,激發(fā)對紙漿畫的興趣。
2、培養(yǎng)動手能力,發(fā)展想象力和創(chuàng)造能力。
3、體驗活動的樂趣,培養(yǎng)合作意識。
二、教學重點與難點
重點:如何制作紙漿畫
難點:紙漿畫作品的靈活應(yīng)用
三、教學準備:水粉顏料、白乳膠、廢紙、牙簽、硬紙板、鉛筆、橡皮等
四、教學過程與設(shè)計
(一)導(dǎo)入:今天我要和同學們一起學習畫畫了,我們之前學習過哪些材料啊?(學生回顧,談?wù)摚?/p>
(二)教學開展:
1、教師:請欣賞若干作品,發(fā)掘和以前的畫用的材料有哪些不一樣,同時看看畫面和色彩處理。(讓學生思考1-2分鐘)請學生回答,再教師小結(jié)進而引入概念什么是紙漿畫?顧名思義用紙做為主要的材料所制作出來的作品。
2、教師提問:我們沒有彩色紙漿怎么辦呢?---------自己制作,增強動手能力。
3、和學生一起制作紙漿,注意教室地面、桌面保持清潔。
(探求新知)4、提問:你發(fā)現(xiàn)碎紙屑拌入顏料后發(fā)生了什么變化?為什么會發(fā)生變化的?白色的紙泥變成彩色的了,穿上了彩衣。是因為紙泥里面添加了彩色的顏料進去。染成了各種顏色。
(三)紙漿畫的制作過程:
1)
在色卡紙或者其他材料上先畫好外輪廓。
2)
將準備好的碎紙屑拌上白乳膠,并調(diào)入所需的顏色,作為紙漿等待備用。
3)?用鑷子取出紙漿粘貼在事先準備好的色卡紙或者是其他的材料上。
(四)制作的過程中要注意的事項:
A
注意色彩的搭配,冷暖色和明暗色的處理。
B紙漿不要過多,粘時不要過厚;紙漿要覆蓋整個畫面。
C
粘貼的過程中一定要讓紙漿和底板充分粘接,以避免干后作品的脫落.
D
粘貼的過程中不要將紙漿表面壓平,從而失去紙漿本身的表面肌理效果。
E
粘貼的過程中各種顏色之間的銜接一定要嚴實,使各色紙漿相互形成一個整體。
F
粘貼的過程中各色紙漿容易混色,所以每做完一種顏色后應(yīng)該清洗工具。
(五)紙漿畫的特點及教學意義:
紙漿質(zhì)地柔軟,可塑性強。安全無毒,無過于復(fù)雜的制作過程,原材料隨處可見。學生在學習制作的同時老師不必為安全而擔憂,學生找到童趣的同時通過紙漿畫的課程學生的手,腦,眼,都得到了鍛煉,紙泥、漿畫裝飾感很強,學生做完的作品完全可以掛到家里做為裝飾畫和藝術(shù)品為自己的房間添彩。也使學生對多種工具表達的探索興趣有了拋磚引玉的積極作用。
(六)(鞏固提高)學生創(chuàng)作階段:下面時間請同學們從以下內(nèi)容中選一個物體或者自創(chuàng)圖稿,用紙漿表現(xiàn)成畫稿。
如:小草莓、西瓜、太陽花、蘋果、梨、香蕉、茄子、胡蘿卜、蝴蝶、七星瓢蟲、棒棒糖、彩色氣球、櫻桃、葡萄、等等。
教師巡查輔導(dǎo):對學生作品進行現(xiàn)場指導(dǎo)。
活動結(jié)束:把作品展示給班級里的同學看中,一起感受成功的喜悅,互相給予評價,以激勵學生進一步深入學習。
(七)課堂小結(jié):(先請學生起來小結(jié),再由老師總評)同學們,今天的課主要是學習了紙漿畫的概念,作畫步驟以及紙漿畫的特點教育意義。
課
題
紙漿畫——水果系列
課時
4
課時
教學目標
1、引導(dǎo)學生學習紙漿畫的制作方法及工具材料的正確使用。
2、能嘗試新的作畫方式,大膽、細心。
3、感知自然事物和美術(shù)作品的形式美、內(nèi)容美,發(fā)展學生觀察、想象、創(chuàng)新思
維能力。
教學重點
紙漿畫的制作方法及工具材料的正確使用。
教學難點
作出一份滿意的作品
教學過程
一、導(dǎo)入
同學們,這節(jié)課我們就來進行水果系列的紙漿畫創(chuàng)作。
二、講解并演示繪制步驟及方法
1、在硬紙板上繪制要制作的圖案。
2、在硬紙板上描已經(jīng)畫好的圖案
3、給紙漿加入顏料
4、用牙簽把紙漿均勻的攤開薄厚要適中,盡量不要留縫隙。
(要先繪制
深顏色部分,每次攤開的部分都要均勻,一部分攤平后再攤開另一部分。
)師邊
講解邊演示
5、每次用牙簽攤平紙漿的時候要讓牙簽與硬紙板相接處。
(就是要讓牙簽扎到底)
6、顏色搭配要合適,沒有干之前不要用手碰。
7、根據(jù)畫面適當?shù)奶幚肀尘啊?/p>
三、指導(dǎo)學生制作、師巡視
發(fā)現(xiàn)問題及時解決
四、評析總結(jié)
1、展示作品、學生自評
2、同學互評(指出優(yōu)點和不足之處)
3、教師總
結(jié)
課
題
紙漿畫——美麗的海底世界
課時
4
課時
教學目標
1、提高學生的動手能力,制作一幅以美麗的花瓶為主題的作品。
2、能創(chuàng)作出一份滿意的作品。
3、感知自然事物和美術(shù)作品的形式美、內(nèi)容美,提高學生的動手能力和動腦能
力。
教學重點
紙漿畫的制作方法及工具材料的正確使用。
教學難點
紙漿畫制作方法的掌握
教學過程
一、導(dǎo)入
同學們,這節(jié)課我們就來進行水果系列的紙漿畫創(chuàng)作。
二、講解并演示繪制步驟及方法
1、在硬紙板上繪制要制作的圖案。
2、在硬紙板上描已經(jīng)畫好的圖案
3、給紙漿加入顏料
4、用牙簽把紙漿均勻的攤開薄厚要適中,盡量不要留縫隙。
(要先繪制
深顏色部分,每次攤開的部分都要均勻,一部分攤平后再攤開另一部分。
)師邊
講解邊演示
5、每次用牙簽攤平紙漿的時候要讓牙簽與硬紙板相接處。
(就是要讓牙簽扎到底)
6、顏色搭配要合適,沒有干之前不要用手碰。
7、根據(jù)畫面適當?shù)奶幚肀尘啊?/p>
三、指導(dǎo)學生制作、師巡視
發(fā)現(xiàn)問題及時解決
四、評析總結(jié)
1、展示作品、學生自評
2、同學互評(指出優(yōu)點和不足之處)
3、教師總
結(jié)
課
題
紙漿畫——自由創(chuàng)作
課時
4
課時
教學目標
1、培養(yǎng)學生的觀察能力和創(chuàng)造能力。
2、提高學生動手和動腦的能力。
教學重點
紙漿畫的制作方法及工具材料的正確使用。
教學難點
方法的掌握和作出一份滿意的作品
教學過程
(要體現(xiàn)教學方法的設(shè)計意圖)
一、欣賞激發(fā)學生的學習興趣。
欣賞風景、人物、動物等紙漿畫作品,分析
制作方法。
二、講解并演示制作方法
材料和工具:
各種顏色的紙漿、牙簽、玻璃、記號筆、透明膠布、畫框等。
1、在紙上繪制以風景為主題的圖案。
2、在玻璃板上將已經(jīng)畫好的圖案描上。
(把玻璃放在圖案的上面,擺好適當
的位置,用記號筆在玻璃上描畫,注意要想好再畫一次畫成,畫的過程中玻璃和
圖案不要竄位置。
)
3、用工具把選好的顏色放到畫好的玻璃上。
(一次不要取太多的紙漿防止浪
費)
4、用牙簽把玻璃上的紙漿均勻的攤開薄厚要適中,盡量不要留縫隙。
(要先繪
制深顏色部分,每次攤開的部分都要均勻,一部分攤平后再攤開另一部分。
)
5、每次用牙簽攤平紙漿的時候要讓牙簽與玻璃相接處。
(就是要讓牙簽扎到底)
6、顏色搭配要合適,沒有干之前不要用手碰。
7、根據(jù)畫面適當?shù)奶幚肀尘啊?/p>
8、整理畫面
9、修整好后裝裱成完美的作品
三、指導(dǎo)學生制作、師巡視
發(fā)現(xiàn)問題及時解決
四、評析總結(jié)
1、展示作品、學生自評
了解如何策劃校園活動。
了解怎樣結(jié)合校園活動進行調(diào)查研究。
通過調(diào)查了解活動所涉及的部門與學科。
跨學科全面的思考與設(shè)計創(chuàng)作出好的策劃
重點如何應(yīng)用美術(shù)的形式把校園生活中設(shè)計的方方面面表現(xiàn)出來。
教學難點
難點找準美術(shù)表現(xiàn)形式與活動策劃的結(jié)合點培養(yǎng)綜合解決問題和整體藝術(shù)策劃的能力。
教學準備
教學準備繩子、水彩、水粉顏色、水彩筆、油畫棒等
教學方法引導(dǎo)、探究合作等
板書設(shè)計
教學過程
一、導(dǎo)入
每一年,我們學校都會組織很多活動,如藝術(shù)節(jié)、繪畫展、科技周等等。它們是一次歡樂的盛會,展示自己的舞臺。如果讓我們班來策劃一次活動,我們有這個信心和能力嗎?板書課題:策劃一次校園活動。
二、新授
在課前我們已經(jīng)以藝術(shù)節(jié)為例,請同學們調(diào)查了關(guān)于藝術(shù)節(jié)的策劃知識,你是通過哪種途徑了解的?生答:專業(yè)書、網(wǎng)上的信息、報紙、雜志、訪談?,F(xiàn)在我們以組為單位共同獻計獻策,以出示題板的方式回答問題,比比誰的方案最優(yōu)秀:
(一)藝術(shù)節(jié)策劃方案將涉及哪些的環(huán)節(jié)?請各小組討論后出示題板,看哪一組同學想
到的詳細:(活動時間、地點、目的、各種宣傳和準備、內(nèi)容安排、活動進程、部門分工、費用預(yù)算、負責組織人員等等)
(二)藝術(shù)節(jié)的內(nèi)容有哪些?開幕式、集體表演、歌舞晚會、朗誦會、猜謎大賽、繪畫比賽、演講天地、游戲比賽、圖書大餐、頒獎晚會……
(三)這么多的活動,應(yīng)該有哪方面的準備?同學們出示:場地的租用、人員的安排、
舞臺的設(shè)計、服裝、道具、器材、宣傳品、美術(shù)材料、獎品等等。
(四)要與哪些部門進行溝通?學校后勤部、器材室、團委、歌舞團、演出公司、美術(shù)公司、贊助單位等。策劃活動的確是一個即復(fù)雜又綜合的過程。
(五)哪些內(nèi)容可以借助美術(shù)這種視覺形式來傳達?學生討論:策劃圖、策劃方案、舞臺布置、宣傳品:如海報、吉祥物、會標、紀念冊、請柬、節(jié)目單、面具、簽到冊、標語等等。老師總結(jié):看來,美術(shù)的作用可真不少,形式也是多種多樣。好的藝術(shù)設(shè)計將使主題更加一目了然,獲得更隆重、成功的效果。
(六)以上我們把校園活動涉及的各方面進行了全方位的討論研究,我們?nèi)绾斡妹佬g(shù)的形式表達策劃的內(nèi)容?
用大屏幕顯示策劃圖的繪制方法、流程圖、路線圖、鳥瞰圖、卡通圖、圖表加說明的幾種方法,并加以解釋說明各自的特點。
如流程圖主要顯示機構(gòu)設(shè)置或表達活動流程;路線圖主要顯示各地點的順序;鳥瞰圖是俯視的直觀效果;圖表加說明更使策劃圖文并茂,清楚明了。
值得注意的如何使各圖統(tǒng)一和諧:可利用幾個明度相近的色塊作背景或用線條、文字或圖標分割或組織成組。做到有主有次,多而不亂。
三、作業(yè)
以組為單位,用所學的美術(shù)知識為學校設(shè)計一個最佳方案,可用手繪或電腦等方法。評選標準:緊扣主題;設(shè)計整體、新穎、多樣;色彩和諧;圖文并茂。
四、總結(jié)
關(guān)鍵詞:白色鏈霉菌(Streptomyces albus);ε-聚賴氨酸;培養(yǎng)基;發(fā)酵工藝
中圖分類號:TS202.3 文獻標識碼:A 文章編號:0439-8114(2013)15-3635-04
ε-聚賴氨酸由25~30個賴氨酸殘基聚合而成,有很強的抑菌能力[1],被FDA批準為安全的天然生物防腐劑,具有巨大的商業(yè)潛力[2]。日本窒素公司已實現(xiàn)ε-聚賴氨酸微生物發(fā)酵的工業(yè)化生產(chǎn),發(fā)酵罐產(chǎn)量達48.30 g/L[3,4]。而國內(nèi)ε-聚賴氨酸的研究還處于實驗室水平,發(fā)酵產(chǎn)量與國外差距很大。劉長江等[5]優(yōu)化了發(fā)酵培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件,ε-聚賴氨酸搖瓶產(chǎn)量為1.50 g/L;陳瑋瑋等[6]對北里孢菌Kitasatospora MY5-36發(fā)酵產(chǎn)ε-聚賴氨酸的條件進行優(yōu)化,搖瓶發(fā)酵產(chǎn)量達1.17 g/L,在5 L發(fā)酵罐內(nèi)批式發(fā)酵產(chǎn)量達7.72 g/L;黃國昌等[7]在50 L自控式發(fā)酵罐中對ε-聚賴氨酸的發(fā)酵條件進行研究,發(fā)酵產(chǎn)量最高達7.36 g/L。本研究采用白色鏈霉菌(Streptomyces albus)N31-16菌株發(fā)酵制備ε-聚賴氨酸,考察碳源、氮源、無機鹽等因素對發(fā)酵的影響,以提高ε-聚賴氨酸產(chǎn)量,為促進ε-聚賴氨酸的工業(yè)化生產(chǎn)提供依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 菌種來源
白色鏈霉菌N31-16菌株,贛南醫(yī)學院微生物實驗室篩選保藏[8]。
1.2 白色鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)ε-聚賴氨酸流程
1.2.1 斜面培養(yǎng) 斜面培養(yǎng)基包括酵母浸出粉 4 g/L、麥芽浸出粉 10 g/L、葡萄糖 4 g/L,pH 7.3。接種環(huán)取一環(huán)平板上單菌落的孢子至斜面,置于30 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4~6 d。
1.2.2 搖瓶種子培養(yǎng) 搖瓶種子培養(yǎng)基為M3G[9],含有葡萄糖50 g/L、(NH4)2SO4 10 g/L、K2HPO4 0.8 g/L、KH2PO4 1.36 g/L、MgSO4·7H2O 0.5 g/L、ZnSO4·7H2O 0.04 g/L、FeSO4·7H2O 0.03 g/L、酵母浸出粉5 g/L,pH 6.8,裝液量為250 mL的三角瓶中裝20 mL培養(yǎng)基。接種環(huán)取一環(huán)斜面孢子,接入種子培養(yǎng)基,在30 ℃、搖床轉(zhuǎn)速220 r/min的條件下培養(yǎng)1 d。
1.2.3 搖瓶發(fā)酵培養(yǎng) 搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基以M3G培養(yǎng)基為基礎(chǔ),添加不同的碳源、氮源和無機鹽,考察其對菌體生長和ε-聚賴氨酸產(chǎn)量的影響,接種量為5%(占發(fā)酵液體積比,下同),其他培養(yǎng)條件同搖瓶種子培養(yǎng)??疾炷骋挥绊懸蛩貢r保持其他培養(yǎng)基成分不變,以M3G培養(yǎng)基為對照,其ε-聚賴氨酸相對產(chǎn)量為100%,每處理設(shè)置3組平行試驗。
1.2.4 發(fā)酵罐發(fā)酵工藝的優(yōu)化 接種量3%,加入優(yōu)化后的發(fā)酵培養(yǎng)基,發(fā)酵溫度30 ℃,轉(zhuǎn)速200~700 r/min,通氣速率2~5 m3/min。分別采用3種工藝進行發(fā)酵,比較各種工藝對菌體生長和ε-聚賴氨酸產(chǎn)量的影響。①工藝一:發(fā)酵液中還原糖濃度降至15 g/L以下后,每隔24 h間歇補糖至25 g/L,pH降至4.3后用氨水控制pH維持在4.3。②工藝二:還原糖濃度降至15 g/L以下后,用流加補糖方式控制發(fā)酵液中還原糖濃度為15~20 g/L,pH降至4.3后用氨水控制pH維持在4.3。③工藝三:還原糖濃度降至15 g/L以下后,采用流加補糖方式控制還原糖濃度為10~15 g/L,72 h后用氨水控制pH維持在4.3。
1.2.5 指標測定 ①干重。發(fā)酵結(jié)束后將發(fā)酵液于12 000 r/min離心3 min,棄上清,沉淀洗滌3次,108 ℃下干燥至恒重后稱重。②菌體濃度(Packed Mass Volume, PMV)。取10 mL發(fā)酵液于4 000 r/min離心10 min,測定上清液體積。PMV=(發(fā)酵液總體積-上清液總體積)/發(fā)酵液總體積×100%。③殘?zhí)呛?。采用斐林試劑法測定發(fā)酵液中殘?zhí)呛?。④?聚賴氨酸含量。采用優(yōu)化后的Itzhaki法[4]測定發(fā)酵液中ε-聚賴氨酸含量。
2 結(jié)果與分析
2.1 搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化
2.1.1 碳源對白色鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)ε-聚賴氨酸的影響 分別選用葡萄糖、土豆淀粉和玉米淀粉作為碳源,每種碳源各取3個水平,共9個處理。不同碳源對白色鏈霉菌菌體生長和ε-聚賴氨酸產(chǎn)量的影響結(jié)果見表1。由表1可知,3種碳源中,葡萄糖為碳源時發(fā)酵效果最好,有利于菌株的生長和ε-聚賴氨酸的積累,但過量的葡萄糖對ε-聚賴氨酸的生物合成有明顯的抑制作用,可能是由于葡萄糖效應(yīng)以及滲透壓過高引起的。當葡萄糖濃度為30 g/L時ε-聚賴氨酸的相對產(chǎn)量最高,為118.9%。
2.1.2 氮源對白色鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)ε-聚賴氨酸的影響
1)單一氮源。分別選用(NH4)2SO4、尿素、大豆蛋白胨、酵母浸出粉為氮源,每種氮源各設(shè)置3個水平,共12個處理。不同氮源對白色鏈霉菌菌體生長和ε-聚賴氨酸產(chǎn)量的影響結(jié)果見表2。由表2可知,使用單一氮源,ε-聚賴氨酸的產(chǎn)量都很低,其中以(NH4)2SO4作為氮源,發(fā)酵液呈酸性,不利于菌體生長,菌體的生物量最低,但ε-聚賴氨酸的相對產(chǎn)量高于其他氮源;以尿素作氮源,發(fā)酵液呈堿性,菌體的生物量和ε-聚賴氨酸的相對產(chǎn)量均較低;而以大豆蛋白胨和酵母浸出粉作氮源,發(fā)酵液的pH呈弱酸性,有利于菌體生長,菌體生物量較高,但發(fā)酵產(chǎn)量很低,可能是發(fā)酵液pH偏高,導(dǎo)致ε-聚賴氨酸合成酶的活力低而降解酶的活力高,合成的ε-聚賴氨酸被降解酶分解[10]。因此考慮采用無機氮源(NH4)2SO4和有機氮源復(fù)合,同時促進菌體生長和ε-聚賴氨酸的分泌。
2)復(fù)合氮源。無機氮源(NH4)2SO4分別與有機氮源大豆蛋白胨和酵母浸出粉組合作為搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基的氮源,(NH4)2SO4濃度設(shè)置2個水平,大豆蛋白胨和酵母浸出粉各設(shè)置3個水平,共12個氮源組合,每處理設(shè)置3次平行試驗,考察其對白色鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)ε-聚賴氨酸的影響,結(jié)果見表3。由表3可知,與(NH4)2SO4和大豆蛋白胨復(fù)合氮源相比,(NH4)2SO4和酵母浸出粉作復(fù)合氮源更有利于菌體的生長和ε-聚賴氨酸的積累。其中10 g/L (NH4)2SO4+10 g/L酵母浸出粉作氮源菌體生物量最大,達12.3%,5 g/L (NH4)2SO4+5 g/L酵母浸出粉最有利于ε-聚賴氨酸的積累,相對產(chǎn)量達119.5%,菌體的生長情況也較好,PMV達9.9%。
2.1.3 正交試驗結(jié)果 根據(jù)碳源和氮源優(yōu)化試驗結(jié)果,以葡萄糖作碳源,(NH4)2SO4和酵母浸出粉作復(fù)合氮源,設(shè)計正交試驗考察發(fā)酵培養(yǎng)基中葡萄糖、(NH4)2SO4和酵母浸出粉濃度對ε-聚賴氨酸產(chǎn)量的影響,因素與水平見表4,結(jié)果見表5。由表5可知,培養(yǎng)基中(NH4)2SO4濃度對ε-聚賴氨酸產(chǎn)量的影響最大,其次是葡萄糖濃度,酵母浸出粉濃度的影響最小。最優(yōu)碳源和氮源組合為A2B2C3,即培養(yǎng)基中葡萄糖、(NH4)2SO4和酵母浸出粉的濃度分別為30、7、7 g/L,此條件下ε-聚賴氨酸產(chǎn)量為1.519 g/L,高于其他正交試驗組合的結(jié)果,比對照M3G培養(yǎng)基提高了28.0%。
2.2 5 L自動發(fā)酵罐發(fā)酵工藝的優(yōu)化
在5 L發(fā)酵罐內(nèi)研究N31-69菌株的發(fā)酵工藝,一方面放大搖瓶研究的成果,另一方面希望通過工藝的優(yōu)化進一步提高ε-聚賴氨酸的產(chǎn)量,為工業(yè)化生產(chǎn)提供依據(jù)。3種不同發(fā)酵工藝下菌體的生長和ε-聚賴氨酸的積累情況見表6~表8。由表6可知,工藝一發(fā)酵前72 h ε-聚賴氨酸基本無合成,當降低pH后,ε-聚賴氨酸開始慢慢合成。72 h還原糖濃度降至15 g/L以下后,每隔24 h間歇補糖至25 g/L,96 h后菌體生物量開始下降,菌體趨于自溶,發(fā)酵168 h時ε-聚賴氨酸產(chǎn)量為2.39 g/L。由表7可知,工藝二用流加補糖方式控制發(fā)酵液中還原糖濃度為15~20 g/L,72 h時降低pH后ε-聚賴氨酸迅速累積。120 h后菌體出現(xiàn)自溶,出現(xiàn)自溶時間更晚。發(fā)酵168 h 時ε-聚賴氨酸產(chǎn)量為8.75 g/L。由表8可知,48 h后采用流加補糖方式控制還原糖濃度為10~15 g/L,72 h后用10%的氨水控制pH在4.3,菌體生物量在發(fā)酵后期一直緩慢增加,未出現(xiàn)明顯的菌體自溶現(xiàn)象,發(fā)酵168 h時ε-聚賴氨酸產(chǎn)量為15.60 g/L。
綜合以上3種發(fā)酵工藝,菌體的快速生長期為12~48 h,在此階段ε-聚賴氨酸基本不合成,降低pH后菌體生長變慢而ε-聚賴氨酸開始大量累積。還原糖濃度的補加方式及濃度對菌體的持續(xù)生長和ε-聚賴氨酸的累積有一定影響,采用流加補糖方式更佳,還原糖濃度控制在10~15 g/L最佳,可使菌體持續(xù)生長。同時發(fā)現(xiàn)在發(fā)酵過程中菌絲形態(tài)發(fā)生較大變化(圖1)。在菌體生長期菌絲呈絮狀,到產(chǎn)物合成期菌絲開始結(jié)球,初期球的核心較松散,外周擴散較大,后期ε-聚賴氨酸大量累積時所形成的菌球越來越致密,球徑變小,而當菌體開始自溶時菌球消失,菌絲斷裂。菌絲形態(tài)變化可能和ε-聚賴氨酸的累積合成有關(guān),有待進一步研究。
3 小結(jié)與討論
本研究通過考察碳源、氮源、無機鹽等因素對白色鏈霉菌N31-69菌株生長和ε-聚賴氨酸產(chǎn)量的影響,對其發(fā)酵培養(yǎng)基進行優(yōu)化。優(yōu)化后的培養(yǎng)基中葡萄糖、(NH4)2SO4和酵母浸出粉的濃度分別為30、7、7 g/L, ε-聚賴氨酸搖瓶發(fā)酵產(chǎn)量達1.519 g/L,比優(yōu)化前產(chǎn)量提高了28.0%。進一步在5 L發(fā)酵罐內(nèi)對N31-69菌株進行發(fā)酵工藝優(yōu)化,48 h后采用流加補糖方式控制還原糖濃度為10~15 g/L,72 h后用10%的氨水控制pH為4.3,發(fā)酵168 h后ε-聚賴氨酸的產(chǎn)量達15.60 g/L。在發(fā)酵過程中菌絲形態(tài)發(fā)生較大變化,可能和ε-聚賴氨酸的累積合成有關(guān),有待進一步研究。
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