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欽 州 學(xué) 院
項目組名稱
大學(xué)生心理健康協(xié)會
項目成果名稱
健康路上,我們一路同行
項目指導(dǎo)老師
聯(lián)系電話
項目負(fù)責(zé)人
聯(lián)系電話
項
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實
施
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簡述活動的目的意義、參與對象、形式內(nèi)容、時間步驟、經(jīng)費來源及安全保障措施等,1500字左右。
“5.25”心理健康教育活動周是我校的特色項目,到目前為止,我校已舉辦了兩屆心理健康教育活動周活動。該項活動的目的旨在通過開展豐富多彩的活動,促進(jìn)同學(xué)們造就健康的自我,陶冶情操、建立自信、不斷提高人際交往能力,從而增強(qiáng)自己的心理素質(zhì)。同時,這種大型、集中的宣傳教育活動也為我校的心理健康教育工作深入、廣泛的開展發(fā)揮了重要作用。心理健康的第一條標(biāo)準(zhǔn)就是認(rèn)識自我,接納自我,能體驗到自己的存在價值,樂觀自信。通過參與宣傳教育周系列活動,同學(xué)們樹立起愛自己、愛家庭、愛他人、愛社會,做一個對自己負(fù)責(zé)、對他人負(fù)責(zé)、對家庭負(fù)責(zé)、對社會負(fù)責(zé)的人的信念,也感受到了“樂觀自信”、“團(tuán)結(jié)協(xié)作”、“善待他人”、“寬容大度”等對自身心理健康發(fā)展的重要意義。
和諧的社會,需要和諧的校園,和諧的校園更需要和諧的心靈,只有使全校師生的心靈健康和諧了,才有可能出現(xiàn)校園的和諧,也才能實現(xiàn)社會的和諧。
活動時間:2008年5月19日——2008年5月25日
活動地點:欽州學(xué)院
活動對象:欽州學(xué)院全體師生
活動主辦單位:學(xué)生工作處、教育科學(xué)部、心理咨詢中心、政工委、學(xué)院團(tuán)委
承辦單位:大學(xué)生心理健康協(xié)會
協(xié)辦單位:欽州瀟文電腦公司、都市翡翠.生活茶坊
活動安排:
(1) “5.25”心理健康活動周開幕式:
時間:2008年5月19日(星期一)17:10
地點:燈光球場
活動流程:
①院領(lǐng)導(dǎo)致開幕詞
②宣讀心理健康周的活動議程
③感謝贊助商對本次活動的大力支持
④分發(fā)心理健康周的宣傳小卡片以及氫氣球
⑤領(lǐng)導(dǎo)宣布活動周開始,鳴放禮花,會員放飛貼有對奧運的祝福的氫氣球
注:放飛心愿:組織會員組成奧運五環(huán),會前由與會者先寫好自己的心愿,在學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)宣布活動周開始時,與會人員放飛貼有心愿的氫氣球。
(2)心理趣味圖畫展—不同的角度,不同的精彩
時間:2008年5月20日(星期二)16:30
地點:禮堂前校道
活動簡介:展出關(guān)于心理方面的圖片,帶給人視覺上的感受,同時提醒同學(xué)們平時對待事物要從多方面考慮,以提高其心理承受能力。
(3)心理問卷調(diào)查測試—認(rèn)識自己,把握未來
時間:2008年5月21日(星期三)16:30
地點:學(xué)院禮堂前校道
活動簡介:測試題內(nèi)容涵蓋感情、性格、就業(yè)等方面的問題,大眾化,趣味性。共計3000份。
(4)心理知識講座
時間:2008年5月22日(星期四)20:00
地點:學(xué)院禮堂
活動簡介:以前一天測試題的內(nèi)容為講解對象,為同學(xué)們解決心理上的疑難問題。
(5)心理電影賞析
時間:2008年5月 23 日(星期五)20:00—21:30
地點:學(xué)院禮堂
活動簡介:通過影片《辣媽辣妹》進(jìn)行點評,讓同學(xué)們體驗家庭的真諦,理解的萬歲,愛的無私!
(6)放飛祝福---為奧運加油
時間:2008年5月24日(星期六)17:10—18:30
地點:足球場
活動簡介:放飛風(fēng)箏,為奧運加油
(7)心理情景劇晚會
時間:2008年5月25日(星期日)20:00—-22:00
地點:學(xué)院禮堂
活動簡介:以情景劇表演為主,表現(xiàn)心理健康的重要性。
北部灣經(jīng)濟(jì)區(qū)的開發(fā)對培養(yǎng)全面發(fā)展的人才十分重視,本次“5.25”心理健康教育活動周不僅得到了欽州學(xué)院心理健康教育基金的專項撥款,而且許多企業(yè)家對我院大學(xué)生的心理素質(zhì)的培養(yǎng)十分重視,紛紛慷慨解囊,并把它當(dāng)成是一種公益事業(yè)。本次心理健康活動得到了欽州瀟文電腦公司和都市翡翠·生活茶坊的大力支持,并贊助了三千元人民幣以及其他活動用品。這些為活動周的成功開展提供了有力幫助。
本次心理健康活動周的安全保障工作由大學(xué)生心理健康協(xié)會內(nèi)設(shè)的組織部聯(lián)合學(xué)院保衛(wèi)科、后勤處負(fù)責(zé)。內(nèi)容包括:
1.將大學(xué)生心理健康協(xié)會組織部分為三組,各組設(shè)一名組長和一名副組長。各組長和副組長在活動舉行前與負(fù)責(zé)人溝通好,并對活動現(xiàn)場進(jìn)行認(rèn)真勘察,對活動可能發(fā)生的情況做好充分的估計和應(yīng)變準(zhǔn)備。
2.各相關(guān)成員對全體參加本次活動的會員進(jìn)行專題安全與環(huán)境教育,增強(qiáng)學(xué)生安全防范意識和自我保護(hù)能力。在活動中提醒同學(xué)們增強(qiáng)保護(hù)環(huán)境和公共財物的意識,注意良好行為習(xí)慣的教育,樹立良好的大學(xué)生形象。
3 .加強(qiáng)管理和監(jiān)控措施,各活動負(fù)責(zé)人要對活動中各個環(huán)節(jié)的安全防范措施做到層層落實,責(zé)任到各負(fù)責(zé)人和分管干部。
4.在活動過程中安排專門的保衛(wèi)人員到活動現(xiàn)場,維持活動的秩序,防止推擠現(xiàn)象發(fā)生,并特別注意學(xué)院禮堂使用過程中的防火、防電、防踩踏等安全保障,保證各通道的暢通。
6.活動中各小組攜帶必須的醫(yī)療急救用品,以防突發(fā)傷害事件,并時刻與校醫(yī)務(wù)室保持聯(lián)系。
7.由于此次活動周活動多時間長,活動的開展易受天氣的影響,各保障小組必須做好充分準(zhǔn)備。
8.活動中所用到的道具和其他用品用玩后要及時回收處理。
9.實行安全事件報告制度和安全責(zé)任追究制度,各活動負(fù)責(zé)人必須保持通訊工具的正常暢通。
項
目
實
施
情
況
總
結(jié)
︵
摘
要
︶
原定方案
執(zhí)行情況
1.由于“5.12”汶川地震的影響以及5月19日到5月21日為全國哀悼日,故本次“5.25”心理健康活動周的活動時間往后推至5月22日開始,并在相關(guān)活動中穿插有關(guān)災(zāi)區(qū)的環(huán)節(jié)。
2.原定在開幕式中放飛氫氣球考慮到其安全性、對欽州氣象預(yù)測以及飛機(jī)飛行航線的影響最后取消。
3.其他活動按照原定計劃正常進(jìn)行。
活 動
成 果
5月25日是“全國大學(xué)生心理健康日”。圍繞這一天,我協(xié)會開展了為期一周的心理健康活動。活動形式多種多樣,其中包括心理趣味圖片展、心理健康問卷調(diào)查測試、心理知識講座、心理電影賞析、心理情景劇晚會等,讓同學(xué)們從多個角度,多個層面去了解心理健康的相關(guān)知識。這一活動正確引導(dǎo)大學(xué)生如何擁有健康的心理,讓大學(xué)生明白心理問題對學(xué)習(xí)、生活的影響。因而在學(xué)生群體中激起強(qiáng)烈反響,受到廣大學(xué)生的歡迎,收到了良好的效果。“關(guān)愛青春、呵護(hù)心理,用心交流,從心開始――讓我們一起攜手,共同關(guān)注心理健康”成了大家共同的心聲。“健康路上,我們一路同行”的信念讓許多同學(xué)糾正了對心理咨詢室即精神病室的錯誤看法,也讓他們明白心理的困惑不等于精神上有問題。
特色
亮點
特色
亮點
本屆心理健康周活動的開展,主要表現(xiàn)出幾個特點:
一是形式多樣,有創(chuàng)新。本次心理健康教育活動周結(jié)合學(xué)校實際情況,通過舉辦心理趣味畫展、現(xiàn)場心理問卷測試、現(xiàn)場咨詢服務(wù)、專題講座、心理電影賞析、心理情景劇晚會等多種形式的活動,全方位的引導(dǎo)大學(xué)生關(guān)注自身心理健康,關(guān)愛他人。本次活動中還首次采用了情景劇等形式組織宣傳教育活動。
二是有趣味性。心理趣味畫展、“放飛心靈,為
災(zāi)區(qū)人民祈福,為奧運加油”、心理電影賞析等活動是立足于校園實際,反映校園生活,通過多種簡單有趣的方式傳達(dá)“我愛我”精神,深受同學(xué)們的喜歡。
三是效果好。許多同學(xué)在心理趣味畫展、心理問卷自測、心理知識講座、心理情景劇晚會等活動中領(lǐng)悟到“我愛我”的精髓,紛紛表示在以后的學(xué)習(xí)生活中多注意關(guān)心自己的身心健康,同時關(guān)心他人。
四是精心組織,宣傳到位?;顒釉O(shè)置的內(nèi)容,大都既有知識性,又有趣味性,真正體現(xiàn)了心理知識的大眾化。此次心理健康活動周宣傳充分考慮到活動前、活動中和活動后的宣傳,為本次活動的開展?fàn)I造了良好的輿論氛圍。每次活動做好專門的宣傳海報提前張貼,并通過大學(xué)生心理健康協(xié)會分布于每班的會員宣傳本次活動,同時分發(fā)由贊助商贊助的引發(fā)有關(guān)心理健康常識的小卡片、日歷卡3000份,讓越來越多的同學(xué)關(guān)注心理健康。此外,我院記者團(tuán)針對本次心理健康教育活動周成立了專門的采訪組,全程跟蹤采訪,并通過廣播、宣傳板報、報刊、雜志介紹活動進(jìn)展情況。
活動
影響
本次心理健康活動周,得到院領(lǐng)導(dǎo)、老師的支持
和同學(xué)們的廣泛關(guān)注 , 在校園里營造了良好的關(guān)注心理、關(guān)愛自我的氛圍。經(jīng)過一整周的心靈釋放,大家了解了更多的心理健康知識,更加懂得珍惜自己、關(guān)愛自我。在迷??鄲赖臅r候,走進(jìn)心理咨詢室成為同學(xué)們走出心理誤區(qū),擺脫心理困擾,更好地放飛心靈的第一選擇!
問題
不足
通過“5.25”心理健康系列活動,提高了大學(xué)生的心理健康水平,增強(qiáng)大學(xué)生的心理保健意識,在校園里掀起關(guān)注心理健康的熱潮,同時在活動中,我們深深地體會到,大學(xué)生對心理健康的關(guān)注不亞于他們對成功和自身發(fā)展的關(guān)注,這說明大學(xué)生的心理健康意識在增強(qiáng)??墒窃诒敬位顒又?,由于自身以及外部的影響,我們沒能與其他高校的心理健康團(tuán)體合作。
反映項目成果的主要附件目錄
附件:
⑴ 項目總結(jié) 1 份
⑵ DVD光盤 1 張
學(xué)校學(xué)工部(團(tuán)委)推薦意見
蓋章
年 月 日
學(xué)校黨委
審核意見
蓋章
年 月 日
專家評
審意見
【摘要】 目的 探討慢性神經(jīng)病理性痛對小鼠細(xì)胞免疫功能的影響。方法 在通過結(jié)扎小鼠單側(cè)脛神經(jīng)和腓總神經(jīng)建立慢性坐骨神經(jīng)病理性疼痛模型的基礎(chǔ)上,利用淋巴細(xì)胞增殖試驗(MTT法)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)動態(tài)觀察慢性神經(jīng)病理性疼痛對T淋巴細(xì)胞增殖活性以及血清中腫瘤壞死因子α(TNFα)和白介素6(IL6)水平的影響。結(jié)果 神經(jīng)病理性疼痛模型小鼠的T淋巴細(xì)胞增殖活性明顯高于假手術(shù)組及對照組,外周血液中的TNFα和IL6亦明顯高于假手術(shù)組及對照組。結(jié)論 小鼠在慢性神經(jīng)病理性疼痛狀態(tài)下細(xì)胞免疫功能明顯增強(qiáng)。
【關(guān)鍵詞】 神經(jīng)病理性痛;腫瘤壞死因子;白介素6;T淋巴細(xì)胞
The influence of chronic neuropathic pain on cellular immune function of mice
ABSTRACT: Objective To explore the influence of chronic neuropathic pain on cellular immune function of mice models. Methods The mice models were established by ligating tibeal nerve and common peroneal nerve on one side, and the influence of chronic neuropathic pain on cellular immune function and tumor necrosis factorα(TNFα) and interleukin6 (IL6 ) was observed with lymphocyte cell increase experiment (MTT method) and enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Results The increased reactivity of T lymphocyte of the model group was significantly higher than that of the sham group and the control group. At the same time, content of TNFα and IL6 in blood of the model group also increased. Conclusion Cellular immune function of mice is increased in the state of chronic neuropathic pain.
KEY WORDS: chronic neuropathic pain; tumor necrosis factorα; interleukin6; T lymphocyte
神經(jīng)病理性痛多見于腫瘤、椎間盤突出、三叉神經(jīng)痛等,其發(fā)病機(jī)理目前尚不清楚。本研究通過建立小鼠慢性神經(jīng)病理性痛模型,探討神經(jīng)病理性疼痛對T淋巴細(xì)胞增殖活性以及血清中腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factorα, TNFα)和白介素6(interleukin6, IL6)表達(dá)的影響,從而為研究其發(fā)生的免疫機(jī)制以及篩選具有鎮(zhèn)痛作用的免疫制劑奠定基礎(chǔ)。
1 材料與方法
1.1 動物模型建立 雄性ICR小鼠(16-18g)購自西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心。通過腹腔注射烏來糖(1.4g/kg)麻醉動物,3-4min后沿小鼠右下肢股部橫向切開皮膚,鈍性分離肌肉并暴露坐骨神經(jīng),玻璃針鈍性分離坐骨神經(jīng)的三個主要分支:脛神經(jīng)、腓總神經(jīng)和腓腸神經(jīng),用0號手術(shù)絲線分別緊扎脛神經(jīng)和腓總神經(jīng),同時確保腓腸神經(jīng)不受損傷。隨后止血、逐層將肌肉和皮膚縫合。術(shù)后1周進(jìn)行模型篩選。假手術(shù)組除不結(jié)扎神經(jīng)外,其余與神經(jīng)病理性痛模型相同[12]。
1.2 動物模型篩選 參照J(rèn)asmin等[3]的冷盤法即冷刺激誘發(fā)的痛覺超敏進(jìn)行動物模型篩選。將模型小鼠放在表面溫度為(4±1)℃的冷盤上,上罩一個500mL的燒杯,小鼠在冷盤上適應(yīng)5min,待小鼠的探究活動基本消失后,記錄小鼠患側(cè)爪在5min內(nèi)的累積抬爪次數(shù)(小鼠活動或變化所引起的抬爪不記入內(nèi)),患側(cè)爪5min內(nèi)累積抬爪次數(shù)大于10次的作為痛模型小鼠。同時測定假手術(shù)組和對照組小鼠的右側(cè)爪在5min內(nèi)累積抬爪次數(shù)[45]。
1.3 小鼠外周血中TNFα、IL6含量的測定 將模型組(100只)、假手術(shù)組(100只)和對照組(100只)小鼠隨機(jī)分為10組,每組約10只。分別在動物模型建立后第1、2、3、5、8、11、14、17、20、23周采集外周血,分離血清并放于含蛋白酶抑制劑的冷磷酸緩沖液中(-20℃保存),待測TNFα、IL6含量(采血后的小鼠迅速處死,無菌狀態(tài)下取其脾臟備用)。ELISA法檢測TNFα、IL6(檢測試劑盒由晶美生物公司提供)。
1.4 T淋巴細(xì)胞增殖活性的測定(MTT法) 將不同時間無菌狀態(tài)下取得的脾臟剪碎,分別放在200目金屬濾網(wǎng)輕輕研磨后,制成2×106/mL的細(xì)胞懸液。將制成的細(xì)胞懸液加入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,每個樣品6孔(3個刺激孔,3個對照孔),每孔加細(xì)胞懸液100μL,3μg/mL PHA 100μL(3個對照孔不加)。將細(xì)胞培養(yǎng)板放于37℃、50mL/L CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)66h后,每孔加入5mg/mL MTT 20μL,繼續(xù)培養(yǎng)6h,離心棄上清液后每孔加二甲基亞砜溶液100μL,用酶標(biāo)測定儀測每孔在570nm波長處的吸光度(A)值。刺激指數(shù)(SI)=刺激孔A值/對照孔A值[7]。
1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示。統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS11.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行oneway ANOVA分析,P
2 結(jié)果
2.1 模型小鼠冷刺激誘發(fā)的痛覺超敏 在動物模型建立后不同時間檢測模型組的患側(cè)爪和假手術(shù)組、對照組的對照側(cè)爪痛覺的改變(表1)。實驗各周模型組的患側(cè)爪5min內(nèi)累積抬爪次數(shù)比假手術(shù)組、對照組的對照側(cè)爪均明顯增加(P0.05)。
表1 不同時間實驗組小鼠5min內(nèi)累積抬爪次數(shù)的比較(略)
Table 1 Comparison of numbers of paw lift in 5 minutes in defferent weeks
*P
2.2 神經(jīng)病理性痛模型小鼠外周血中TNFα、IL6含量的變化 模型組小鼠外周血中TNFα、IL6質(zhì)量濃度均比假手術(shù)組明顯增高(P0.05,表2)。
表2 不同時間各組實驗小鼠外周血中TNFα、IL6含量的比較(略)
Table 2 Comparison of the content TNFα and IL6 in blood in defferent weeks
**P
2.3 各組實驗小鼠T細(xì)胞增殖活性的改變 動物模型篩選后不同時間檢測實驗各組T增殖細(xì)胞活性SI值。模型組的T細(xì)胞增殖活性比假手術(shù)組明顯升高(P0.05,表3)。
表3 不同時間各組實驗小鼠T細(xì)胞增殖活性的比較(略)
Table 3 Comparison of increased reactivity in T lymphocyte in defferent weeks
*P
3 討論
為了研究神經(jīng)病理性痛的發(fā)病機(jī)制,許多研究者建立了各種各樣的動物疼痛模型。這些模型從不同的角度模擬神經(jīng)損傷引起的神經(jīng)功能紊亂和神經(jīng)病理性痛,為認(rèn)識和探究神經(jīng)病理性疼痛的機(jī)制以及篩選治療性藥物提供了良好的工具。模型一般都是人為損傷動物的感覺傳導(dǎo)通路造成的,損傷的部位為外周神經(jīng)干、脊神經(jīng)、背根及脊髓等;損傷的方法以機(jī)械損傷(如橫切或結(jié)扎)為主,也有采用冰凍或缺血性損傷等方法[67]。但目前用于神經(jīng)病理性痛模型的動物多采用大鼠,至于小鼠,目前采用的較少。其實小鼠遺傳背景已比較清楚,并且小鼠價格低廉,飼養(yǎng)方便,故用小鼠作為神經(jīng)病理性痛的模型動物會更具潛力。本實驗利用小鼠成功建立了神經(jīng)病理性痛模型。模型鑒定結(jié)果顯示在實驗第1-23周模型組小鼠出現(xiàn)了明顯的冷刺激誘發(fā)的痛覺超敏,5min抬爪次數(shù)與假手術(shù)組、對照組小鼠比較有顯著性差異(P0.05)。因而,模型組小鼠痛覺明顯異常主要是由于脛神經(jīng)和腓總神經(jīng)結(jié)扎所致。提示慢性神經(jīng)疼痛小鼠模型制作成功,而且該模型可維持5個月以上,是一種較為理想的神經(jīng)病理性痛模型。神經(jīng)病理性疼痛是臨床上常見的一種難治病,但其發(fā)病機(jī)理,尤其是免疫機(jī)制目前尚不清楚。本研究在成功建立慢性神經(jīng)病理性疼痛模型小鼠的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步研究了神經(jīng)病理性疼痛對小鼠細(xì)胞免疫功能的影響。結(jié)果顯示,在神經(jīng)損傷發(fā)生后第1-23周小鼠T淋巴細(xì)胞增殖活性明顯增強(qiáng),模型組小鼠外周血中TNFα、IL6水平與假手術(shù)組、對照組比較也明顯增高(P
參考文獻(xiàn)
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關(guān)鍵詞:中緬樹;腎上腺能激素;產(chǎn)熱
中圖分類號:Q93
文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:1674-9944(2015)12-0001-03
1引言
低溫脅迫是刺激小型哺乳動物產(chǎn)熱能力增加的主要環(huán)境因子之一[1]。低溫條件下小型哺乳動物往往會增加其靜止代謝率(Resting metabolic rate, RMR)和非顫抖性產(chǎn)熱(Nonshivering thermogenesis, N)[2]來適應(yīng)這樣的環(huán)境。低溫脅迫刺激靜止代謝率和非顫抖性產(chǎn)熱增加的產(chǎn)熱機(jī)理是不同的,刺激靜止代謝率的增加主要來自內(nèi)臟器官產(chǎn)熱能力的增加,如肝臟[3],非顫抖性產(chǎn)熱的增加則主要是通過褐色脂肪組織(Brown adipose tissue, BA)中解偶聯(lián)蛋白(Uncouping protein, UCP)的數(shù)量和活性的增加,從而使得非顫抖性產(chǎn)熱增加[4]。
靜止代謝率是動物維持正常生存的最低代謝水平,能反映不同種群或物種的能量消耗水平,對動物適應(yīng)環(huán)境的理解具有重要的意義[6]。動物主要是通過交感神經(jīng)釋放去甲腎上腺素(norepinephrine, NE)來參與非顫抖性產(chǎn)熱的調(diào)節(jié),之前的研究認(rèn)為非顫抖性產(chǎn)熱是腎上腺能受體刺激的產(chǎn)熱[7],非顫抖性產(chǎn)熱對于小型哺乳動物適應(yīng)低溫環(huán)境具有重要的意義[8]。β3\|腎上腺能受體(β3\|adrenergic receptor, β3\|AR)特異性激動劑BRL37344能有效激活BA產(chǎn)熱系統(tǒng),導(dǎo)致非顫抖性產(chǎn)熱產(chǎn)熱顯著增加[9]。中緬樹(upaia belangeri)屬攀目(candentia)樹科(upaiidae),為東洋界特有的小型哺乳動物,我國云貴高原及其附近的橫斷山區(qū)可能是中緬樹的分布的北限[10]。對中緬樹冷馴化條件下的RMR和N的研究有助于了解中緬樹在低溫脅迫條件下的適應(yīng)對策,從而進(jìn)一步闡述該動物對環(huán)境變化的適應(yīng)性。
4討論
本研究組先前的研究表明:隨著中緬樹棲息地緯度和海拔高度的增加,中緬樹RMR和N出現(xiàn)明顯的季節(jié)性變化[14],低溫[1]和短照[16]脅迫可以顯著刺激產(chǎn)熱能力的增加,而且在低溫馴化條件下中緬樹的RMR增加的比例大于N增加[17],本研究在此基礎(chǔ)上,對冷馴化條件下不同腎上腺能受體激動劑對中緬樹產(chǎn)熱能力的影響進(jìn)行了研究。
參考文獻(xiàn):
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【摘要】
目的 探討海洛因及嘌呤核苷酸對大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響。方法 體外培養(yǎng)大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,分別以不同濃度的海洛因及嘌呤核苷酸處理細(xì)胞,MTT 比色法檢測海洛因和嘌呤核苷酸對細(xì)胞增殖的影響。 結(jié)果 MTT 實驗表明,海洛因?qū)Υ笫?C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖有抑制作用,120 mg/L海洛因作用 24 h對 C6 細(xì)胞的抑制率達(dá) 52%,并表現(xiàn)為劑量依賴性;嘌呤核苷酸對 C6 細(xì)胞的增殖有促進(jìn)作用,120 mg/L嘌呤核苷酸作用 24 h,細(xì)胞增殖率為 30%,并表現(xiàn)為劑量依賴性。結(jié)論 海洛因抑制大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖;嘌呤核苷酸促進(jìn)大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖,并在某種程度上對抗海洛因?qū)?C6 細(xì)胞增殖的抑制作用。
【關(guān)鍵詞】 嘌呤核苷酸;海洛因;神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞;細(xì)胞增殖。
【Abstract】Objective To investigate the effects of heroin and purine nucleotides on the proliferation of C6 glioma cells. Methods The effects of heroin and purine nucleotides on the proliferation of C6 glioma cells were evaluated by MTT assay. Results Heroin inhibited the growth of C6 glioma cells in vitro,52% C6 glioma cells were inhibited when the cells were treated with 120 mg/L heroin for 24 h;purine nucleotides promoted the proliferation of C6 glioma cells,30% C6 glioma cells were promoted when the cells were treated with 120 mg /L purine nucleotides for 24 h. Conclusions Heroin inhibits the proliferation of C6 glioma cells,purine nucleotides promotes the proliferation of C6 glioma cells.
【Key words】Purine nucleotides;Heroin;Glioma cells;Proliferation
由于大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞膜上存在阿片受體,目前已被廣泛用作研究各種阿片類藥物作用機(jī)制的模型系統(tǒng)〔1,2〕。本實驗室研究發(fā)現(xiàn),海洛因不但能夠抑制大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖,而且還能使細(xì)胞內(nèi)嘌呤核苷酸分解代謝增強(qiáng)〔3,4〕。已經(jīng)明確的是海洛因?qū)?C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖有抑制作用,但是嘌呤核苷酸對經(jīng)過海洛因處理過的大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖是否有影響并未見報道。本實驗在前期研究發(fā)現(xiàn)的基礎(chǔ)上,以大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞作為靶細(xì)胞,研究嘌呤核苷酸對海洛因處理的大鼠C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響,探索嘌呤核苷酸治療阿片類成癮的潛在機(jī)制。
1 材料與方法
1.1 材料和儀器
C6 細(xì)胞株購自上海細(xì)胞研究所。低溫臺式離心機(jī)購自上海化工機(jī)械廠。倒置顯微鏡購自上海蔡康光學(xué)儀器有限公司。CO2培養(yǎng)箱購自日本 SANYO 公司。超凈工作臺購自蘇州尚田潔凈技術(shù)有限公司。DMEM培養(yǎng)基購自 Gibco公司,新生牛血清購自天津血液研究所。噻唑藍(lán) (MTT)、一磷酸腺苷 AMP 和一磷酸鳥苷 GMP購自Sigma公司。海洛因 (純度為99% ) 由吉林省公安廳提供,臨用時用滅菌三蒸水溶解。
1.2 大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞培養(yǎng)
C6 為貼壁生長的細(xì)胞。培養(yǎng)基為 DMEM,每100 ml培養(yǎng)基含青霉素 1 萬U,鏈霉素10 mg,新生牛血清 15 ml,用滅菌的 5.6% NaHCO3 溶液調(diào) pH7.2,置于 CO2 孵箱,37℃、5% CO2 條件下培養(yǎng)。細(xì)胞生長至近融合狀態(tài)時,用 0.25% 胰酶消化傳代,每周2~3次。
1.3 MTT 比色法檢測海洛因?qū)?/p>
C6 細(xì)胞增殖的影響及最佳藥物劑量篩選 將處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,用0.25%胰酶消化,用吸管將細(xì)胞吹打成單細(xì)胞懸液,血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù);將細(xì)胞以 1×104個/cm2 的濃度接種到 96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,每組均設(shè) 3 個平行孔。以生理鹽水作對照,加入海洛因使其終濃度分別為10、40、80 和 120 mg/L,37℃、5% CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24 h 后加入 20 μl濃度為 5 g/L的MTT,培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng) 4 h;棄培養(yǎng)基,每孔加入 DMSO 200 μl,室溫振蕩 10 min 后,用酶標(biāo)儀在波長 490 nm處測定吸光度值,計算細(xì)胞的生存率 (%) = (各實驗組 OD 值/對照組 OD 值)×100%,繪制細(xì)胞生長曲線。
1.4 MTT 比色法測定嘌呤核苷酸對海洛因處理細(xì)胞增殖的影響
將處于對數(shù)生長期的細(xì)胞用0.25%胰酶消化,用吸管將細(xì)胞吹打成單細(xì)胞懸液,血球計數(shù)板計數(shù);將細(xì)胞以1×104個/cm2的濃度接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,每組均設(shè)3個平行孔。對照組為海洛因處理組,加入海洛因使其終濃度為120 mg/L;嘌呤核苷酸處理組在加入120 mg/L海洛因的同時,加入等摩爾混合的嘌呤核苷酸,使嘌呤核苷酸終濃度分別為10、40、80和120 mg/L,37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后加入20 μl濃度為 5 g/L 的MTT,培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)4 h;每孔加入 DMSO 200 μl,室溫振蕩10 min 后,用酶標(biāo)儀在波長 490 nm處測定吸光度值,計算細(xì)胞生存率(%)=(各實驗組OD值/對照組OD值)×100%,繪制細(xì)胞生長曲線。
1.5 統(tǒng)計學(xué)分析
用SPSS 13.0 統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行方差齊性檢驗及成組設(shè)計資料 t檢驗。
2 結(jié) 果
2.1 海洛因?qū)6 細(xì)胞增殖的影響及最佳藥物濃度
MTT 實驗發(fā)現(xiàn),低劑量 (10 mg/L) 的海洛因?qū)Υ笫?C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的抑制作用并不明顯,490 nm處吸光度值為1.393±0.084,其抑制率僅為 7%,與對照組(1.497±0.091)比較差異不顯著 (P>0.05)。當(dāng)海洛因的濃度達(dá)到40 mg/L時,490 nm處吸光度值為0.967±0.097,對 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的抑制率為 35%;海洛因濃度為 80 mg/L 時,490 nm處吸光度值為0.777±0.067,抑制率為 48%;海洛因濃度為 120 mg/L 時,490 nm處吸光度值為0.713±0.068,抑制率為 52%;與對照組比較,差異均有顯著性 (P<0.05)。因此本文選擇 120 mg/L的海洛因作為最佳藥物劑量。
2.2 嘌呤核苷酸對海洛因處理的 C6 細(xì)胞增殖的影響
海洛因?qū)φ战M490 nm處OD值為0.847±0.081,與海洛因組比較,嘌呤核苷酸的濃度為 10和 40 mg/L 時,490 nm處OD值分別為(0.573±0.077,0.803±0.098),對大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的作用并不明顯 (P>0.05)。嘌呤核苷酸的濃度達(dá)到80 mg/L時,490 nm處OD值為1.037±0.059,細(xì)胞增殖率為 22%;嘌呤核苷酸的濃度為 120 mg/L時,490 nm處OD值為1.097±0.114,細(xì)胞增殖率為 30%;與海洛因組比較,差異均有顯著性 (P<0.05)。
3 討 論
研究發(fā)現(xiàn),海洛因能夠抑制體外培養(yǎng)的大鼠神經(jīng)元細(xì)胞增殖,其機(jī)制是海洛因誘導(dǎo)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡〔5〕。阿片類藥物嗎啡對去甲基丙咪嗪 (抗抑郁藥) 和內(nèi)皮素等藥物處理后的大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖有抑制作用〔6〕。除此之外,本研究還發(fā)現(xiàn),嗎啡對沒有經(jīng)過任何藥物處理的大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖也有抑制作用〔7〕。海洛因抑制大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖,其機(jī)制是海洛因使大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞中增殖細(xì)胞核抗原(PCNA) 表達(dá)減少 〔3,4〕。本實驗通過 MTT 比色法也證實了海洛因濃度達(dá)到 40 mg/L 時,以劑量依賴的方式抑制大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖。同時,本實驗通過 MTT 比色法證明,嘌呤核苷酸的濃度達(dá)到 80 mg/L時,以劑量依賴的方式促進(jìn)大鼠 C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖。這一結(jié)果表明,嘌呤核苷酸能夠?qū)购B逡驅(qū)Υ笫?C6 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的抑制作用,其機(jī)制有待進(jìn)一步探討。
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1.資料與方法
1.1一般資料
以醫(yī)院婦產(chǎn)科2012年3月-2014年3月接收的40例胎盤前置先兆流產(chǎn)狀態(tài)患者為對象,其中經(jīng)產(chǎn)婦21例,初產(chǎn)婦19例,患者平均年齡為28.36歲,平均孕周為27.8周,有人工流產(chǎn)史的為13 例。中央性前置胎盤為5例,部分性前置胎盤為20例, 邊緣性前置胎盤為15例。臨床表現(xiàn)均為下腹不規(guī)則脹痛及陰道少量的流血(陰道流血量<500 ml);均無心臟病、糖尿病等病史,心電圖檢查亦都正常;在鹽酸利托君的使用上都無禁忌癥。
1.2治療方法
將50mg鹽酸利托君溶入250ml的5%葡萄糖液中靜脈滴注,初始劑量可以定位每分鐘5滴左右,在了解患者宮縮具體情況的基礎(chǔ)上可以酌情增加,以每十分鐘增加5滴為準(zhǔn)。不過最大量不能超過0.35mg每分鐘,有效劑量保持在18小時后可將點滴停止。停藥前30分鐘改口服鹽酸利托君片,每兩小時口服10mg,維持1天,之后第二天、第三天???酌情增強(qiáng)時間或劑量,維持一周停藥,用藥時需對孕婦和胎兒心率加以注意。
1.3護(hù)理干預(yù)
護(hù)理觀察指標(biāo):對患者實施鹽酸利托君治療前,應(yīng)對患者的身體狀況正確評估,相關(guān)醫(yī)護(hù)人員要給予患者熱情關(guān)心,除此之外,醫(yī)護(hù)人員需密切觀察用藥中和用藥后患者的各項指標(biāo)變化情況。[2]如患者腹痛及腰酸環(huán)節(jié)情況、陰道出血情況,治療開始到結(jié)束的時間,孕期延長具體天數(shù),使用藥物后都有哪些不良反應(yīng)癥狀等,做好護(hù)理記錄。
專業(yè)護(hù)理:首先,相關(guān)護(hù)理人員在患者用藥過程中必須保證患者處于絕對臥床休息狀態(tài),最好使患者保持左側(cè)臥位,以緩解子宮對下腔靜脈的壓迫情況,促進(jìn)胎盤血液供應(yīng)的提高和胎兒健康發(fā)育。除休息外,主要護(hù)理人員還需用心患者生活方面的護(hù)理,對患者的需求應(yīng)盡量滿足,減少對可能給患者帶來的任何外來刺激,以使患者的子宮達(dá)到絕對休息的狀態(tài)。其次,在飲食方面,護(hù)理人員應(yīng)為患者制定或推薦營養(yǎng)豐富的食譜,保證患者飲食中蔬菜必須新鮮,水果等粗纖維食物是護(hù)理人員應(yīng)提醒患者多進(jìn)食的食物,以促進(jìn)患者大便保持通暢,避免腹壓出現(xiàn)過度使用情況。再次,護(hù)理人員還應(yīng)注意患者會陰清潔護(hù)理,提醒患者勤換護(hù)墊,當(dāng)陰道出現(xiàn)出血狀況時指導(dǎo)患者用0.5%活力碘每天2次擦洗會陰,以避免發(fā)生感染。第四,對胎兒宮內(nèi)監(jiān)護(hù)進(jìn)行加強(qiáng),指導(dǎo)患者如何自數(shù)胎動,及時關(guān)注患者胎動次數(shù),一旦發(fā)現(xiàn)過多或過少情況,應(yīng)立即對其性吸氧胎心音監(jiān)護(hù)。
1.4統(tǒng)計學(xué)方法
對統(tǒng)計學(xué)軟件包SPSS15.0加以采用,對各種數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
2.結(jié)果
治療效果:平均用藥4.7小時的時間段內(nèi)40例患者宮縮情況開始出現(xiàn)好轉(zhuǎn),陰道出血也逐漸減少和停止。所有患者中,有37例患者被治愈出院;由于陰道出血情況反復(fù)而繼續(xù)進(jìn)行住院治療的例數(shù)為1例;經(jīng)產(chǎn)婦妊娠28 周用藥后保胎無效的患者為1例,但之后分娩出一個活嬰;1例患者用藥后顯示完全性前置胎盤,放棄保胎。38例孕婦延長孕周35周以上,保胎成功率為95%。
不良反應(yīng)情況:在靜脈滴注鹽酸利托君過程中,心率增快的患者為35例,心率達(dá)100~140 次/min;部分患者有輕微心悸、氣促,在對其行左側(cè)臥位、吸氧及對滴數(shù)適當(dāng)減少后均可耐受;2例孕婦出現(xiàn)胎動頻繁情況,但停止靜脈用藥后即恢復(fù);無肺水腫、心功能衰竭等嚴(yán)重并發(fā)癥。
3.討論
反復(fù)無痛性陰道出血是前置胎盤的典型癥狀,相關(guān)數(shù)據(jù)統(tǒng)計,前置胎盤陰道出血者中伴有宮縮的患者占80%左右,且其中大多數(shù)為宮縮弱。其出血多因為子宮下段逐漸伸展,導(dǎo)致胎盤錯位剝脫,進(jìn)而出現(xiàn)出血狀況。胎盤在剝脫出血后,會破壞蛻膜細(xì)胞溶酶體,在脂酶A2釋放下促進(jìn)PG 合成,從而導(dǎo)致子宮收縮加重。所以,胎盤前置狀態(tài)先兆流產(chǎn)治療時應(yīng)抑制宮縮,延長孕周,從而提升保胎成功率。
鹽酸利托君的有效成分為鹽酸芐羥麻黃堿,這一成分為β2受體激動劑,鹽酸利托君中的有效成分能結(jié)合子宮肌細(xì)胞表面的β2受體,在這一情況的支持下實現(xiàn)對細(xì)胞膜的腺苷酸環(huán)化酶的激活,幫助三磷酸腺苷完成向環(huán)磷酸腺苷的轉(zhuǎn)化,從而促進(jìn)肌球蛋白輕鏈激酶活性的降低,以使肌質(zhì)網(wǎng)釋放鈣的情況得到有效抑制,進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的降低,抑制子宮肌纖維產(chǎn)生收縮。作為第一個被美國食品藥監(jiān)局承認(rèn)和批準(zhǔn)的可以對先兆流產(chǎn)及早產(chǎn)進(jìn)行治療的藥物,鹽酸利托君具有顯著的效果。但我們也應(yīng)看到由于有β1受體激動作用,患者在用藥初期可能會產(chǎn)生一些不良反應(yīng),通常表現(xiàn)為心率加快等,不過隨著使用時間的延長,這種不良反應(yīng)將逐漸下降和穩(wěn)定。[6]此外,少數(shù)的患者在實施鹽酸利托君治療后可能會引起肝功能、血糖、肺水腫等。
變“指點江山”為主動服務(wù)
“你申報的課題已受理?!?月中下旬,向市科委申報科研課題的單位和個人都相繼收到了這條信息。
這是怎么一回事?
原來,2005年4月19日,科委班子成員正面對面征求委機(jī)關(guān)中層干部意見時,一位院士專程到科委機(jī)關(guān)詢問他申報項目的有關(guān)情況。這事讓委黨組書記、主任周旭頗多感慨:“一個院士尚且如此,何況其他人。這說明我們的服務(wù)不及時、不到位。”委領(lǐng)導(dǎo)當(dāng)即研究提出3條整改意見:一是科委業(yè)務(wù)處室一旦收到課題申報材料,要根據(jù)申報單位和個人所留聯(lián)系方式,馬上向其發(fā)送“已經(jīng)受理”的手機(jī)短信或電子郵件;二是專家評審結(jié)果產(chǎn)生后,要及時告知其申報課題是否立項,并根據(jù)本人意愿,對其申報材料作出退還或銷毀處理;三是要加快網(wǎng)絡(luò)建設(shè),推進(jìn)網(wǎng)上申報、受理科技項目工作進(jìn)程。重慶醫(yī)科大學(xué)張強(qiáng)教授收到課題“已受理”信息后感慨地說,多年來,對科技項目的立項,都是由各單位和科研人員申報,科委組織有關(guān)專家評審。雖然程序正確,也較公正,但仍有一些單位和個人認(rèn)為不公開、公正,心中有怨氣。究其根源還是少數(shù)科技管理人員動輒大而化之“指點江山”,缺乏主動細(xì)致服務(wù)的意識??莆谙冗M(jìn)性教育活動中邊查邊改,給大家一個“明白賬”,他從心底里感到高興。
變“按部就班”為限時辦結(jié)
“科技項目申請立項時間太長,有時一個項目要半年時間?!边@是科委征求到的又一條意見。在分析評議中大家發(fā)現(xiàn),之所以出現(xiàn)這種情況,一是有的申報對象的立項申報書不符合要求,有的需要修改二三次;二是受理過程復(fù)雜,一個項目要經(jīng)過幾個業(yè)務(wù)處室、上上下下幾十道程序。對此,他們開始從三個方面予以改進(jìn):一是細(xì)化服務(wù)。將項目名稱、申報要求及文本格式等內(nèi)容,全部編入項目申報指南,使申報單位和個人一目了然,做到讓服務(wù)對象少跑路甚至不跑路;二是簡化程序。對項目實行集中申報、集中評審,減少立項、經(jīng)費下?lián)茉诳莆瘷C(jī)關(guān)業(yè)務(wù)處室的運轉(zhuǎn)環(huán)節(jié);三是“亮紅燈”。對專家評審?fù)ㄟ^的項目,相關(guān)業(yè)務(wù)處室在30個工作日內(nèi)未與申報單位和個人簽訂責(zé)任書,給予“黃燈”提示;45個工作日內(nèi)未簽訂責(zé)任書的,“紅燈”警告;60個工作日內(nèi)未簽訂責(zé)任書的,取消項目計劃,并在次年度減少該業(yè)務(wù)處的項目管理計劃。如今,項目從申請立項到簽訂責(zé)任書,較以往減少了2-3個月時間,大大提高了工作效率。
變“沒人負(fù)責(zé)”為跟蹤問效
[關(guān)鍵詞] 缺血后處理;上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)變;腎纖維化
[中圖分類號] R692.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210(2013)09(b)-0009-04
腎缺血再灌注損傷不僅可以在短期內(nèi)引起腎功能不全、衰竭,而且還可以導(dǎo)致慢性腎小管間質(zhì)纖維化。腎小管間質(zhì)纖維化是各種病因的腎臟疾病進(jìn)展到終末期腎病的必要環(huán)節(jié),而腎小管上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)變(EMT)在腎纖維化過程中扮演重要角色。因此,本研究利用筆者已經(jīng)建立的成熟的體外模型,研究體外缺血后處理是否對缺血再灌注損傷導(dǎo)致腎小管EMT產(chǎn)生影響,現(xiàn)報道如下:
1 材料與方法
1.1 實驗細(xì)胞
腎小管上皮細(xì)胞系NRK-52E購自中科院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞資源中心,培養(yǎng)于培養(yǎng)皿中,95%空氣/5% CO2、pH 7.4、37°C條件下,每2天更換培養(yǎng)液。所有細(xì)胞均在實驗前用無血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h。
1.2 主要藥物、試劑
DMEM培養(yǎng)基,胎牛血清(美國,Hyclone);Annexin V-FICT/PI雙染試劑盒(美國,Bender,B MS1031) ;三氣細(xì)胞培養(yǎng)箱(美國,REVCO公司);α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)單克隆抗體,轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)單克隆抗體,結(jié)締組織生長因子(CTGF)單克隆抗體(cell signaling),β-actin單克隆抗體(Santa cruz)
1.3 實驗方法
1.3.1 細(xì)胞模型的建立
1.3.1.1 對照(COS)組 同步化24 h后,用對照緩沖液1 mL,培養(yǎng)3 h,然后更換DMEM 培養(yǎng)基2 mL,在正常條件下(5%CO2+95%空氣、37℃)培養(yǎng)至指定的時間點。
1.3.1.2 缺血再灌注損傷(IRI)組 同步化24 h后,用pH 7.4的無血清DMEM培養(yǎng)液1 mL沖洗已匯合成片的大鼠腎小管上皮細(xì)胞,接著用pH 7.4的無糖DMEM培養(yǎng)液1 mL沖洗細(xì)胞,再用無血清、無糖的缺血培養(yǎng)液1 mL在缺氧條件下(0.5%O2+5%CO2+94.5%N2、37℃)培養(yǎng)3 h,再灌注時換用完全DMEM培養(yǎng)基2 mL,在正常條件下(5%CO2+95%空氣、37℃)培養(yǎng)至指定的時間點。
1.3.1.3 缺血后處理(IPO)組 同步化24 h后,更換缺血緩沖液1 mL,并在缺氧條件下(0.5%O2、5%CO2、飽和濕度)條件下培養(yǎng)3 h,然后添加0.5 mL新鮮的完全培養(yǎng)基,在正常條件下(空氣氧濃度、5%CO2、飽和濕度、37℃)培養(yǎng)10 min,模擬再灌注環(huán)境,再在缺血條件下(0.5%O2、5%CO2、飽和濕度)培養(yǎng)10 min,模擬缺氧環(huán)境,此20 min為1個循環(huán),共計3個循環(huán)。最后添加完全培養(yǎng)基2 mL在正常條件下(空氣氧濃度、5%CO2、飽和濕度、37℃)培養(yǎng)至指定的時間點。
1.3.2 觀察指標(biāo)與測定方法
腎小管上皮細(xì)胞NRK-52E在缺血再灌注損傷和缺血后處理后3、6、12、24 h各時間點,收集細(xì)胞提取總蛋白,行Western blot檢測腎小管上皮間質(zhì)變相關(guān)指標(biāo),如α-SMA、TGF-β1、CTGF蛋白表達(dá)。
1.3.3 HOECHST檢測細(xì)胞凋亡
用預(yù)溫1×PBS緩沖液,洗滌細(xì)胞2次。加入5 μL Hoe chst 33342染色液于各組細(xì)胞,輕輕晃動混勻,然后孵育箱避光孵育10 min。 加入5 μL PI染色液,輕輕混勻,室溫避光孵育10 min,用熒光顯微鏡檢測各組細(xì)胞。Hoechst33342的最大激發(fā)波長350 nm,最大發(fā)射波長為460 nm,PI的最大激發(fā)和最大發(fā)射波長分別為488 nm和615 nm。
1.3.4 Western blot測定方法
提取細(xì)胞總蛋白。SDS-PAGE進(jìn)行蛋白質(zhì)分離,電轉(zhuǎn)至NC膜,5%脫脂奶粉封閉1 h后,TBS洗膜。封閉液中按1∶1000加一抗,即相應(yīng)單克隆抗體(β-actin作參照),緩慢搖動4℃過夜,棄去一抗,TBST洗膜,加羊抗兔IgG二抗,緩慢搖動1 h,TBST洗膜?;瘜W(xué)發(fā)光法曝光,顯影定影,拍照觀察膠片上的條帶,Quantity One軟件分析灰度。
1.4 統(tǒng)計學(xué)方法
采用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,多組間比較采用單因素方差分析,組間兩兩比較采用LSD-t檢驗,以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 Hochest檢測各組細(xì)胞凋亡
Hochest檢測顯示,COS組腎小管上皮細(xì)胞沒有明顯凋亡,IRI組腎小管上皮細(xì)胞凋亡明顯,而IPO組凋亡明顯減少(圖1)。
A:COS組;B:IRI組;C:IPO組;與COS組相比,IRI組與IPO組的凋亡細(xì)胞數(shù)量增多;同時,與IRI組相比,IPO組凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯降低;箭頭表示凋亡細(xì)胞
2.2 Western blot檢測結(jié)果
腎小管上皮細(xì)胞α-SMA蛋白表達(dá)結(jié)果如圖2所示:IRI組α-SMA隨時間延長表達(dá)逐漸增強(qiáng),且24 h時表達(dá)最強(qiáng);而IPO組α-SMA隨時間延長表達(dá)逐漸減弱,24 h表達(dá)最弱。在12 h和24 h時間點,IRI組α-SMA表達(dá)明顯較COS組高,IPO組表達(dá)明顯較IRI組低(P < 0.05)。
腎小管上皮細(xì)胞TGF-β1蛋白表達(dá)結(jié)果如圖3所示:IRI組TGF-β1在缺血再灌注3、6 h時表達(dá)最強(qiáng),之后減弱;而IPO組表達(dá)方式與IRI組相似,但表達(dá)量明顯弱于IRI組(P < 0.05)。在3 h和6 h時間點,IRI組和IPO組TGF-β1蛋白表達(dá)較COS組高,IPO組表達(dá)較IRI組低(P < 0.05)。
腎小管上皮細(xì)胞CTGF蛋白表達(dá)結(jié)果如圖4所示: IRI組CTGF在缺血再灌注3、6 h表達(dá)最強(qiáng),之后減弱;而IPO組表達(dá)方式與IRI組相似,但表達(dá)量明顯弱于IRI組(P < 0.05)。在3 h時間點,IRI組和IPO組CTGF蛋白表達(dá)明顯較COS組高,IPO組較IRI組低(P < 0.05)。
與IRI組比較,*P < 0.05;與COS組比較,#P < 0.05;α-SMA:α-平滑肌肌動蛋白
與IRI組比較,*P < 0.05 ;與COS組比較,#P < 0.05;TGF-β1:轉(zhuǎn)化生長因子-β1
與IRI組比較,*P < 0.05 ;與COS組比較,#P < 0.05;CTGF:結(jié)締組織生長因子
3 討論
腎缺血再灌注損傷隨著時間的推移,腎功能以及腎臟的病理改變會逐步恢復(fù),但是由損傷導(dǎo)致的腎小管會發(fā)生不可逆性改變,表現(xiàn)為腎小管纖維化,從而導(dǎo)致腎小管濃縮功能下降,腎功能不全[1-3]。既往的觀點認(rèn)為再灌注期間,腎小管有很強(qiáng)的增殖修復(fù)能力,缺血再灌注可以完全逆轉(zhuǎn)[4]。但近年來有研究發(fā)現(xiàn),腎小管上皮細(xì)胞的增殖修復(fù)能力是有限的,它依賴于小管細(xì)胞存活的數(shù)量和基底膜是否完好。一旦損傷程度超過某一臨界值,腎小管的損傷就是不可逆的,腎小管的結(jié)構(gòu)和功能就不能完全恢復(fù)[5]。有研究發(fā)現(xiàn),中度的腎小管間質(zhì)纖維化病變雖然沒有引起血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)等指標(biāo)異常升高,但是可以破壞腎小管的尿液重吸收功能,使夜尿增多,出現(xiàn)蛋白尿[5]。EMT的過程最初被描述是作為在胚胎發(fā)育授予原始上皮細(xì)胞形成中胚層和原始神經(jīng)上皮轉(zhuǎn)變?yōu)樯窠?jīng)脊細(xì)胞的能力中的早期事件[6-7]。過去10年,越來越多的研究表明,EMT是肌成纖維母細(xì)胞在纖維化過程中招募的一個重要直接路徑:在導(dǎo)致局部因子成分改變的損傷條件下,成熟的上皮細(xì)胞特殊形態(tài)消失,穿過腎小管基底膜到間質(zhì),最終“分化”為肌成纖維細(xì)胞表型,具備合成和沉積細(xì)胞外基質(zhì)能力[8-9]。此外,Iwano等[10]的研究發(fā)現(xiàn),在腎損傷引起的腎纖維化過程中腎小管上皮EMT起了主導(dǎo)作用。IPO的定義是一系列間斷、快速、反復(fù)的缺血應(yīng)用在缺血的器官或組織長期缺血之后,長時間再灌注之前。IPO有更多的臨床應(yīng)用價值,許多研究報道證實,IPO可以減輕系統(tǒng)炎癥反應(yīng),抑制凋亡分子的表達(dá),激活內(nèi)源性保護(hù)分子。因此,本研究利用筆者前期已經(jīng)建立的體外模型,研究模擬的缺血后處理對腎小管EMT的影響,明確在體外IPO是否能減輕EMT。
α-SMA是肌成纖維細(xì)胞的標(biāo)志,而肌成纖維細(xì)胞是成纖維細(xì)胞的活化形式,同時也是細(xì)胞外基質(zhì)膠原成分的主要來源[11-12]。在正常腎組織中α-SMA僅在動脈平滑肌細(xì)胞中表達(dá),而在本研究中可以看到其表達(dá)在IRI組隨再灌注時間的延長逐漸增加,且在24 h時最強(qiáng);而在IPO組表達(dá)卻隨時間延長,逐漸減弱,在24 h時表達(dá)最弱;說明在體外缺血再灌注損傷也能夠誘導(dǎo)α-SMA表達(dá),誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞獲得間質(zhì)極性,以及EMT的發(fā)生。缺血后處理可以減輕α-SMA表達(dá)。
腎間質(zhì)纖維化是各種原因所致的腎臟進(jìn)行性損害導(dǎo)致腎功能不全的共同通路。TGF-β1被認(rèn)為是眾多的致纖維因子中的重要一個,它的主要功能為增加細(xì)胞外基質(zhì)的合成,抑制其降解,整合素基質(zhì)黏附分子的上調(diào)[13-14]。有許多對TGF-β1/Smad通路的研究發(fā)現(xiàn),拮抗TGF-β1活化可以減輕腎間質(zhì)纖維化[14]。Azuma等[15]研究發(fā)現(xiàn),通過上調(diào)TGF-β1可以使腎小管細(xì)胞外的基質(zhì)增加,說明TGF-β1的持續(xù)增高有促進(jìn)纖維化的可能。本研究中腎小管上皮細(xì)胞缺血再灌注后3、6 h TGF-β1表達(dá)明顯增強(qiáng),而缺血后處理顯著減弱其激活表達(dá),表明IPO能夠抑制缺血再灌注腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)TGF-β1的蛋白表達(dá)。
CTGF是一種基質(zhì)蛋白,在病理性纖維化中扮演重要角色。體內(nèi)和體外實驗研究證實,CTGF表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞,暗示其參與腎臟纖維化和腎小管上皮EMT。CTGF是慢性移植腎病中EMT的潛在生物標(biāo)志[16-17]。本研究發(fā)現(xiàn),腎小管上皮細(xì)胞缺血再灌注3 h后 CTGF表達(dá)明顯增強(qiáng),而缺血后處理能減弱其激活表達(dá),表明IPO能夠抑制缺血再灌注腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)CTGF的蛋白表達(dá)。
缺血再灌注損傷可以誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞α-SMA的表達(dá),誘導(dǎo)上皮細(xì)胞EMT;而原因可能與激活TGF-β1,進(jìn)而也抑制基質(zhì)蛋白的降解,促進(jìn)基質(zhì)蛋白CTGF的表達(dá)等有關(guān);同時IPO能有效抑制α-SMA、TGF-β1、CTGF的表達(dá),說明其能抑制EMT的發(fā)生。對缺血后處理減輕腎小管上皮細(xì)胞再灌注后EMT的研究,有益于防治腎缺血后纖維化。
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關(guān)鍵詞:科研項目 項目化管理 系統(tǒng)開發(fā)
中圖分類號:TP39 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:1007-9416(2015)05-0000-00
1引言
高職院校以往的科研管理工作很大程度上依賴人工進(jìn)行,從課題申報、立項評審、任務(wù)書提交、項目審核、中期檢查、結(jié)題申請到專家評審、課題管理、成果推廣等環(huán)節(jié)都是依靠office文檔、紙質(zhì)操作和召開現(xiàn)場評審會議,這種傳統(tǒng)的管理方式導(dǎo)致數(shù)據(jù)匯總困難、數(shù)據(jù)冗余、工作效率低、數(shù)據(jù)不能共享,難以及時有效的掌握最新的科研情況,影響到教師和評審專家的正常授課時間,增加科研管理工作量,降低了服務(wù)水平。
2系統(tǒng)需求分析
2.1 系統(tǒng)功能需求
實現(xiàn)課題申報、立項評審、任務(wù)書提交、項目審核、結(jié)題申請、結(jié)題驗收全過程系統(tǒng)化、信息化、項目化管理。實現(xiàn)項目申請立項、結(jié)題驗收專家網(wǎng)上評審功能,由系統(tǒng)自動進(jìn)行計算排名。申請人提交立項或者結(jié)題申請材料后,由科技秘書對項目進(jìn)行匯總分類,按照項目內(nèi)容進(jìn)行分組,安排評審專家。課題評審專家接到任務(wù)后,在系統(tǒng)設(shè)置的規(guī)定時間內(nèi),只需一臺可以上網(wǎng)的計算機(jī)和相關(guān)附屬設(shè)備(鍵盤、鼠標(biāo)等)即可登錄系統(tǒng)開展評審工作,時間靈活度高,同時也節(jié)約了紙張的大量使用,節(jié)約學(xué)院辦公經(jīng)費,提高評審效率。項目立項申請流程如圖1:
建立項目補(bǔ)錄模塊。把學(xué)院歷史立項的所有項目和院外申報項目進(jìn)行電子系統(tǒng)進(jìn)檔,建立項目數(shù)據(jù)庫,使科研管理工作規(guī)范化、科學(xué)化和信息化;實現(xiàn)科研項目綜合查詢與統(tǒng)計功能。對相關(guān)類別科研項目數(shù)據(jù)實現(xiàn)圖形化統(tǒng)計,生成水晶數(shù)據(jù)報表;實現(xiàn)科研課題項目化管理。
2.2 用戶功能需求
系統(tǒng)的用戶角色有:普通教師、二級部門管理者、科研處管理人員、評審專家、系統(tǒng)管理員。各用戶角色功能如下。
普通教師:普通教師即課題的申報者,訪問系統(tǒng)具有的權(quán)限主要有:瀏覽、錄入個人信息、查詢個人信息;填寫、上傳課題立項申請、任務(wù)書、結(jié)題驗收的材料;查詢項目評審情況;查詢科研課題進(jìn)展;科研檔案輸出打印、項目補(bǔ)錄等。二級部門管理者:在系統(tǒng)中設(shè)置學(xué)校二級管理部門的管理者,主要是對屬于本部門科研課題的立項申請、合同任務(wù)書和項目結(jié)題驗收申請作基本的審核,查詢本部門科研情況??蒲刑幑芾砣藛T:主要是科技秘書,主要權(quán)限是查詢項目立項申請、驗收申請情況,對項目進(jìn)行形式審核、分類,安排評審專家,填寫科研處、校學(xué)術(shù)委員會意見;補(bǔ)錄歷史項目和院外項目;同時,對優(yōu)秀項目進(jìn)行成果推廣。
2.3系統(tǒng)架構(gòu)
高職院校科研管理系統(tǒng)的開發(fā)過程中,是以MVC三層架構(gòu)為依托,并在其基礎(chǔ)上進(jìn)行了改造,增加了管理權(quán)限層,使其更符合本系統(tǒng)開發(fā)的需要,增加的全新權(quán)限層,能更好的控制權(quán)限管理,使其可實現(xiàn)到對每一底層按鈕的控制
3系統(tǒng)主要功能模塊開發(fā)
3.1系統(tǒng)時間段設(shè)置模塊的實現(xiàn)
通過對系統(tǒng)時間段的設(shè)置來限制系統(tǒng)使用者對系統(tǒng)的操作權(quán)限,同時也為規(guī)范科研處對科研項目的管理起到一定輔助作用。主要有立項申報開始、結(jié)束時間,任務(wù)書提交開始、結(jié)束時間,中期審查開始、結(jié)束時間,驗收申請開始、結(jié)束時間等4個時間段(點)的設(shè)置。并提供了新增時間段和修改已設(shè)置時間段的功能。
3.2科研項目管理模塊的實現(xiàn)
項目申報模塊:主要頁面元素有:列表窗控件、按鈕、下拉菜單等等。通過該頁面可以完成項目申請立項書的錄入和保存;項目修改導(dǎo)出模塊主要提供了在查詢、修改、輸出打印和刪除申報書的功能。項目任務(wù)書管理模塊:提供了項目任務(wù)書的錄入和輸出打印功能。對已超出系統(tǒng)規(guī)定的立項申請時間和已通過科研處審核的項目進(jìn)行操作將出現(xiàn)相應(yīng)報錯提示。項目驗收申請管理模塊:提供了項目驗收申請信息錄入和結(jié)題驗收申請表的輸出打印。對輸入數(shù)據(jù)格式不正確和已通過科研處審核的項目操作顯示報錯提示。項目主持人可以查看立項評審、驗收評審的評審專家打分情況和評審意見。
4 結(jié)語
科研管理系統(tǒng)上線運行以來,順利完成了多個項目全過程項目信息化管理,取得了良好的效果。展望未來,隨著云技術(shù)、跨平臺移動終端技術(shù)的逐漸成熟,為高??蒲许椖抗芾硖峁┝诵碌乃悸贰?/p>
參考文獻(xiàn)
[1]鄧敏,徐方.科研管理系統(tǒng)與高??蒲泄芾硇畔⒒痆J].科技創(chuàng)業(yè)月刊,2010(12):93-94.
1 概述
近年來,我國科技投入持續(xù)大幅度增長,“十一五”期間全社會研發(fā)投入年均增長率超過23%,“十二五”以來繼續(xù)高速增長,2013年達(dá)到11906億元,其中企業(yè)研發(fā)支出占76%以上。與此同時,從中央到地方各級政府都設(shè)立了種類繁多的政府專項資金、財政貼息、科技計劃項目、人才計劃項目、各類評獎、各類認(rèn)證等科技項目,中央財政科學(xué)技術(shù)支出也保持高速增長,從2006年的774億元增加到2013年的2460億元,年均增長率約18%。隨著財政資金支持力度的加大以及政府科技宣傳的普及,越來越多的企事業(yè)單位積極開展科研項目立項,參與科研項目申報,提高其科技創(chuàng)新能力。
然而,由于科研項目申報需要較強(qiáng)的科技創(chuàng)新綜合實力來支撐,各企業(yè)科技創(chuàng)新能力、科技管理水平、申報人員職業(yè)能力和所處行業(yè)領(lǐng)域等不同,其申報質(zhì)量差距較大。不少企業(yè)盡管有好的項目,但因?qū)φ呃斫獠蝗?、對指南學(xué)習(xí)不透徹、沒把握好最佳申報時機(jī)、申報材料沒有體現(xiàn)出創(chuàng)新性和先進(jìn)性、申報材料嚴(yán)謹(jǐn)性和邏輯性不足等各種因素,導(dǎo)致無法獲得評審專家認(rèn)可,未獲項目立項,令人惋惜。基于此,筆者對當(dāng)前企業(yè)在項目申報過程中存在的問題進(jìn)行剖析,結(jié)合筆者科技管理工作經(jīng)驗,提出科研項目申報相關(guān)策略,以期為企業(yè)科研管理提供有益的借鑒。
2 科研項目申報過程中存在的主要問題
2.1 企業(yè)管理層對科研項目申報工作一知半解
很多科技企業(yè)管理層對科研項目申報工作一知半解,沒有清晰地認(rèn)識到科研項目申報工作的重要意義,對科技政策和申報指南研究不透徹,對科研項目申報的工作要求不重視。企業(yè)管理層只看到了科研項目申報的經(jīng)濟(jì)效益,沒有看到政府科技立項的社會品牌效益以及為企業(yè)帶來的無形資產(chǎn)。管理層對本行業(yè)發(fā)展比較熟悉,但對國家科技發(fā)展規(guī)劃、政策研究不夠,企業(yè)科研項目與政府科技規(guī)劃脫節(jié),跟不上社會發(fā)展趨勢與潮流,導(dǎo)致科研項目與申報指南存在較大差距。企業(yè)重視技術(shù)開發(fā)與市場拓展,但對科研項目申報、政府部門溝通、政府組織的科技活動等認(rèn)識不足,科研管理人員與科研管理體制配置不足,導(dǎo)致科研項目申報成功率很低,影響企業(yè)科技創(chuàng)新能力的提升。
2.2 沒有做好企業(yè)科技發(fā)展規(guī)劃與科研項目申報計劃
科研項目申報實質(zhì)上是企業(yè)科技創(chuàng)新能力的綜合體現(xiàn),科研項目申報的成功是企業(yè)科技創(chuàng)新規(guī)劃能力的成功。科研項目申報體現(xiàn)了科技開發(fā)、市場開發(fā)、經(jīng)營管理、科研管理、財務(wù)管理、知識產(chǎn)權(quán)、產(chǎn)學(xué)研、科技與經(jīng)營人才等方面的科技創(chuàng)新綜合能力,這些科技創(chuàng)新能力的形成,需要企業(yè)制定一定的科技創(chuàng)新規(guī)劃與實施計劃。同時,科研項目申報工作需要編制申請報告,準(zhǔn)備附件資料,涉及行業(yè)背景、人才團(tuán)隊、技術(shù)方案、運營方案、市場方案、投資分析、財務(wù)預(yù)算、社會效益、知識產(chǎn)權(quán)、科技查新、項目備案、用戶報告、資質(zhì)認(rèn)定等,有些資料需要一定的準(zhǔn)備周期,從材料準(zhǔn)備和協(xié)同工作方面來說,科研項目申報需要進(jìn)行一定的籌劃,制定詳盡的科研項目申報計劃,但是大多數(shù)科技企業(yè)還處于“臨時抱佛腳”的突擊申報狀態(tài)。
2.3 沒有建立規(guī)范的科研管理制度
科技項目管理是一個系統(tǒng)工程,它是項目管理技術(shù)與具體科技項目相結(jié)合的產(chǎn)物,科技項目管理過程是建立在一般項目管理過程的基礎(chǔ)上,結(jié)合科技項目的特點而進(jìn)行的,按照科技項目實施階段不同可分為立項、實施過程、項目驗收管理。盡管部分企業(yè)對科技政策有點了解,清楚些許申報渠道,但是企業(yè)內(nèi)部并沒有建立較為規(guī)范的科研管理制度,甚至沒有建立立項管理制度,對于科研項目申報采取簡單粗暴的“突擊申報”方式進(jìn)行,具體表現(xiàn)為:缺乏項目前期的調(diào)研工作,或者草率摘取項目內(nèi)容作為創(chuàng)新點,或者沒有很好地總結(jié)項目承擔(dān)單位的優(yōu)勢,如此種種皆是因科研管理制度缺失導(dǎo)致的申報準(zhǔn)備不充分現(xiàn)象,評審專家難以評價申報項目的先進(jìn)性以及承擔(dān)單位的科研實力,從而影響項目的獲資助率。解放軍后勤工程學(xué)院科研處李永德指出國家自然科學(xué)基金項目未獲資助的申報項目主要存在創(chuàng)新程度低、缺乏應(yīng)有前期研究工作等問題。
2.4 沒有設(shè)立相應(yīng)的科研管理機(jī)構(gòu)和人員
科研管理工作內(nèi)容包括科研項目申報、知識產(chǎn)權(quán)申報、科技獎勵申報、項目監(jiān)理及驗收、科技宣傳、與政府部門接洽、研發(fā)機(jī)構(gòu)管理和運營等,看似瑣碎,實則十分緊要,許多中小企業(yè)沒有設(shè)立相應(yīng)的科研管理機(jī)構(gòu)和人員,科研管理工作缺乏職業(yè)化、專業(yè)化和標(biāo)準(zhǔn)化,在項目申報時難以編寫出符合申報要求的項目申請書和可行性研究報告,申報材料組織零散、缺乏秩序,甚至沒有準(zhǔn)備妥當(dāng)申報前必須的財務(wù)審計報告、科技查新報告、知識產(chǎn)權(quán)等證明材料,使企業(yè)科研項目難以獲得政府立項。
2.5 技術(shù)創(chuàng)新性與核心競爭力闡述不清晰
國家和省科技支撐計劃支持的重點項目主要圍繞能夠整體帶動產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新能力提升的產(chǎn)業(yè)核心技術(shù),以獲得發(fā)明專利等自主知識產(chǎn)權(quán)為目標(biāo),加強(qiáng)高技術(shù)前沿戰(zhàn)略部署,研發(fā)內(nèi)容具有前沿先導(dǎo)性、能推進(jìn)相關(guān)新興產(chǎn)業(yè)實現(xiàn)重大技術(shù)突破;面上項目圍繞產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新和新興產(chǎn)業(yè)培育,以突破核心關(guān)鍵技術(shù)、取得自主知識產(chǎn)權(quán)為目標(biāo),著力提升產(chǎn)業(yè)競爭力,項目研發(fā)內(nèi)容具有先進(jìn)性。申報課題的創(chuàng)新都是要求在前人沒有研究過或是已有基礎(chǔ)上的再創(chuàng)造。對照這些要求,多數(shù)企業(yè)的項目僅以突破企業(yè)核心技術(shù)為目標(biāo),缺乏對產(chǎn)業(yè)核心技術(shù)的攻關(guān)和研究。同時大多數(shù)企業(yè)在申報時不注重查新,不注重項目產(chǎn)品與同行類似項目產(chǎn)品進(jìn)行參數(shù)對比,課題的創(chuàng)新性得不到第三方和數(shù)據(jù)的支撐,評審專家難以評判。
2.6 企業(yè)重申報輕實施
大多數(shù)企業(yè)都是重申報輕實施。申報時動員公司各方面力量,熱情很高,十分重視。項目立項后,對項目執(zhí)行過程卻沒有給予足夠的關(guān)注,對項目實施缺乏計劃和有效監(jiān)管,大都沒有制定項目實施計劃,對于課題任務(wù)和考核指標(biāo)沒有進(jìn)行計劃落實,項目實施難以按計劃推進(jìn),遇到困難也沒有專人負(fù)責(zé)解決,不利于項目的執(zhí)行。驗收時臨時抱佛腳,驗收證明材料準(zhǔn)備不足,導(dǎo)致項目驗收不成功,影響企業(yè)信用記錄,從而影響新的科研項目申報,形成惡性循環(huán)。
3 科研項目申報策略分析
3.1 做好政策研究與申報規(guī)劃
充分的政策研究能夠確保申報資料的準(zhǔn)確性,積極的申報規(guī)劃能夠確保申報準(zhǔn)備工作充分,提高申報質(zhì)量。良好的項目申報需要從以下三個方面進(jìn)行政策研究與申報規(guī)劃:
首先,企業(yè)科研管理人員要及時關(guān)注國家與地方科技發(fā)展規(guī)劃、國家重點支持的高新技術(shù)領(lǐng)域等,如“十三五”規(guī)劃、“中國制造2025”、“促進(jìn)大數(shù)據(jù)發(fā)展行動綱要”等綱領(lǐng)性文件,了解國家對本企業(yè)所在行業(yè)的支持力度,研究、分析本企業(yè)科研項目獲得國家科技資助的可能性。
其次,科研管理人員要研究、分析歷年科技項目申報通知,根據(jù)歷年的科技申報政策和企業(yè)科研項目情況,制定企業(yè)科研項目申報年度計劃,統(tǒng)籌安排企業(yè)科研項目申報工作,獲得公司管理層的認(rèn)同和公司相關(guān)資源支持。
最后,對于資金支持較大的重點項目,如國家級、省市級重點項目,企業(yè)應(yīng)該編制重點項目專項申報計劃,進(jìn)行部門分工與合作,明確各部門的職責(zé)和權(quán)利,要求各部門按照時間節(jié)點提交申報資料,發(fā)揮申報計劃對各部門的約束力,順利完成科研項目申報的準(zhǔn)備工作。
合理的規(guī)劃與計劃能夠提高科研項目申報效率和質(zhì)量,起到事半功倍的效果。
3.2 加強(qiáng)科研項目立項管理
科研項目立項管理是科研項目申報的關(guān)鍵環(huán)節(jié),要嚴(yán)把科研項目立項關(guān),從源頭確保科研項目的質(zhì)量。企業(yè)應(yīng)設(shè)立相應(yīng)的科研管理部門或?qū)B毧蒲泄芾砣藛T,每年定期(一般是每年12月份或1月份)組織技術(shù)開發(fā)部門策劃、確立并申報企業(yè)科技項目。規(guī)范的立項流程主要包括:
首先,技術(shù)開發(fā)部門根據(jù)國內(nèi)外市場需求,通過市場調(diào)查、收集信息,科學(xué)分析、預(yù)測國內(nèi)外相關(guān)產(chǎn)品或技術(shù)的發(fā)展動態(tài),與同類企業(yè)、同類產(chǎn)品進(jìn)行對比,尋求新產(chǎn)品開發(fā)的方向和目標(biāo)。
其次,技術(shù)開發(fā)部門根據(jù)收集的各類信息,策劃、確立新產(chǎn)品開發(fā)、新技術(shù)開發(fā)等科研項目,編制科研項目立項建議書或可行性研究報告,組織評審并經(jīng)部門負(fù)責(zé)人審批后,將擬立項項目向科研管理部門提出立項申請并提供立項建議書或可行性研究報告。
最后,科研管理部門組織公司技術(shù)委員會的專家對各技術(shù)開發(fā)部門申報的科研項目進(jìn)行立項評審,評審?fù)ㄟ^的項目上報公司,由公司進(jìn)行決策,確定年度公司科研項目。
在項目申報階段,科研管理部門應(yīng)高度重視項目的選題,要選擇符合國家和企業(yè)戰(zhàn)略目標(biāo)、符合市場需求、有資源有條件地實施,并且能夠申報成功的先進(jìn)產(chǎn)品和技術(shù)開發(fā)項目,要根據(jù)政策研究結(jié)論選擇符合國家產(chǎn)業(yè)政策的項目,提高項目中標(biāo)率。企業(yè)要重視項目的前期調(diào)研,要根據(jù)科技部門的項目指南從國內(nèi)外技術(shù)現(xiàn)狀、本企業(yè)技術(shù)現(xiàn)狀、未來發(fā)展趨勢等方面進(jìn)行調(diào)研和可行性分析,做好扎實的前期準(zhǔn)備工作。要認(rèn)真審查項目的必要性、創(chuàng)新性和可行性,從項目總體目標(biāo)、主要研究內(nèi)容、技術(shù)實施路線、進(jìn)度安排、項目經(jīng)費等方面確保項目開展是必要的、創(chuàng)新的和可行的。
3.3 提前統(tǒng)籌項目資源,做好相關(guān)的準(zhǔn)備工作
科研項目申報時間一般都很短,從申報通知發(fā)出到申報截止時間大多只有1個月左右的時間,如果在項目通知出來之后才開始準(zhǔn)備申報材料難免局促,會對申報材料的質(zhì)量造成一定影響。項目申報過程中一般會涉及到的公司內(nèi)部部門有檔案部、人事部、財務(wù)部、技術(shù)部、市場部等,公司外部部門有審計公司、查新機(jī)構(gòu)、科技主管部門、環(huán)保局、發(fā)改委等,需要提前統(tǒng)籌的項目資源包括人事資料、財務(wù)信息、技術(shù)文檔、市場調(diào)研報告、公司資質(zhì)、查新報告、檢測報告、專利、環(huán)評報告、備案文件等,因此需要較長的時間去準(zhǔn)備、申請、獲取上述這些項目資源,同時還要花費較多的時間與精力撰寫一份立意新穎、層次合理、詞句妥當(dāng)、財務(wù)分析清晰的項目申請報告或可行性研究報告,所以提前部署可避免倉促準(zhǔn)備申報材料帶來的質(zhì)量隱患,是項目申報成功的關(guān)鍵。
3.4 加強(qiáng)政府部門溝通,掌握申報流程與關(guān)鍵點
政府溝通是科研項目申報的另一關(guān)鍵環(huán)節(jié),一方面可以了解更多的政策信息,提高項目申報質(zhì)量;另一方面可以讓政府部門對企業(yè)情況和項目情況有更深入的了解和認(rèn)識。通常政府部門更傾向于熟悉的企業(yè)和項目,對于不熟悉的企業(yè)和項目保持高度警惕。企業(yè)應(yīng)該積極向政府部門匯報企業(yè)和項目情況,獲得政府部門的認(rèn)可和支持,對于項目申報成功和企業(yè)科技創(chuàng)新工作起著重要的助推作用。
首先,在政府提倡建立“服務(wù)型機(jī)關(guān)”的大環(huán)境下,“公仆們”是非常歡迎企業(yè)去登門拜訪尋求幫助和指導(dǎo)的,同時政府部門的發(fā)展也需要企業(yè)的積極支持,比如定期上報企業(yè)報表,積極去科委部門進(jìn)行項目備案,讓政府部門多多了解所轄企業(yè)的發(fā)展?fàn)顩r,讓政府了解到自己企業(yè)在行業(yè)里技術(shù)水平是領(lǐng)先的、財務(wù)狀況是良好的、企業(yè)運作是正常的、市場前景是廣闊的、管理團(tuán)隊是過硬的,這對于政府和企業(yè)都是有好處的。
其次,企業(yè)要多溝通、多問詢,掌握項目申報的渠道和要點。一般來說,如果是處于研發(fā)和中試階段的項目,考慮從當(dāng)?shù)乜平滩块T往上申報;如果是產(chǎn)業(yè)化的項目就從發(fā)改委往上申報;如果是技術(shù)改造類項目就從經(jīng)信委往上申報;當(dāng)然還有特殊項目可考慮從財政、中小局等部門申報。
最后,項目申報上去后,也要及時跟進(jìn)項目評審情況,即使項目沒有立項成功,也可以向主管部門多請教,找到失敗原因以便下次改正。
3.5 提升企業(yè)科技創(chuàng)新能力
科技創(chuàng)新是企業(yè)發(fā)展的根本推動力,是增強(qiáng)企業(yè)市場競爭力的關(guān)鍵。提升企業(yè)科技創(chuàng)新能力可從以下三個方面著手:
首先,培育創(chuàng)新創(chuàng)造氛圍,重視技術(shù)人才培養(yǎng)和能力提升,從根源鼓勵創(chuàng)新,建立激勵機(jī)制,做到獎勵有章,有功必獎,及時兌現(xiàn),激發(fā)技術(shù)人員的創(chuàng)新積
極性。
其次,引進(jìn)行業(yè)技術(shù)領(lǐng)軍人才,給予其廣闊的發(fā)揮平臺和一流的人才、設(shè)施配備,形成包括可研分析、技術(shù)開發(fā)、技術(shù)驗證的研發(fā)團(tuán)隊,在完善的管理制度基礎(chǔ)上,源源不斷地為企業(yè)發(fā)展注入核心動力。
最后,加強(qiáng)科技合作,一方面和科研院所開展產(chǎn)學(xué)研合作,和科研院所共同探討先進(jìn)技術(shù)的產(chǎn)業(yè)化可行性方案;另一方面加強(qiáng)和供應(yīng)商、客戶之間的合作開發(fā),通過產(chǎn)業(yè)鏈上下游的資源共享、優(yōu)勢互補(bǔ),共同探討產(chǎn)業(yè)關(guān)鍵共性技術(shù)開發(fā),拉近技術(shù)革新與落地實踐之間的距離,提高成果轉(zhuǎn)化效率。
3.6 重視項目預(yù)算和財務(wù)管理
規(guī)范項目申報的另一個重點是項目申請經(jīng)費的詳細(xì)、合理預(yù)算。預(yù)算是確定項目資助額度和經(jīng)費支出的直接依據(jù),要高度重視。科研項目如果缺乏經(jīng)費預(yù)算或者預(yù)算不夠科學(xué)合理,很難得到政府專項資金支持,同時也不利于項目規(guī)范管理和控制。如果項目經(jīng)費預(yù)算得合理,不但能夠提高項目的中標(biāo)率,而且可以保證項目實施的順利進(jìn)行。
在申報科研項目時,科技人員要根據(jù)相關(guān)經(jīng)費管理辦法明確說明各項支出的用途,并要注意項目主管部門能給予的經(jīng)費支持額度,注意申請金額不可超得過高。在項目執(zhí)行過程中,要加強(qiáng)對項目經(jīng)費管理,做到單獨核算,??顚S茫瑖?yán)格按照項目預(yù)算進(jìn)行支出,在執(zhí)行過程中如有調(diào)整,應(yīng)按照相應(yīng)管理辦法進(jìn)行規(guī)范的預(yù)算調(diào)整,確保項目按計劃開展,項目經(jīng)費按計劃使用,從而確保項目順利驗收,保持良好信用記錄,為下一次申報項目奠定良好信用基礎(chǔ)。
3.7 加強(qiáng)項目實施管理與項目驗收工作
科研項目實施與驗收關(guān)系項目的成敗也是影響企業(yè)后續(xù)項目申報和企業(yè)誠信,所以企業(yè)不僅要重視科研項目申報,同樣也要重視項目實施與驗收工作。
科研項目獲得政府資金立項支持后,企業(yè)應(yīng)根據(jù)課題任務(wù)書和考核指標(biāo),制定項目實施計劃,落實公司各部門的工作任務(wù),要求各部門按照時間節(jié)點完成課題任務(wù),通過分工與合作的方式完成科研項目課題任務(wù)。
項目驗收前,科研管理部門應(yīng)該對照課題任務(wù)書評估課題完成情況。如果課題完成情況與課題任務(wù)書規(guī)定的指標(biāo)差距較大,要及時采取措施進(jìn)行補(bǔ)救。如果課題是按計劃順利實施的,驗收時則根據(jù)要求準(zhǔn)備相關(guān)驗收資料,重點針對課題任務(wù)和考核指標(biāo)準(zhǔn)備相關(guān)的科技成果證明材料,評審專家主要考察企業(yè)的科研證明材料,權(quán)威機(jī)構(gòu)提供的證明資料對項目驗收起著重要的加分
作用。
4 結(jié)語
近年來,科技扶持政策越來越向企業(yè)特別是中小企業(yè)傾斜,同時申報要求和評審也越來越嚴(yán),“臨時抱佛腳”或“一槍頭”的申報方式的弊端愈加明顯,所申報的項目往往在專家評審階段就遭到淘汰。因此,越來越多的企業(yè)開始重視科研項目立項和申報工作,如何加強(qiáng)科研項目管理,如何提升科研項目申報成功率,如何獲取更多的政府資金以及社會資金支持,如何推動企業(yè)科
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